Bestimmung des Thyroxin-bindenden Globulins (TBG) mit Hilfe des Competitive Ligand-Binding Assay (CLBA): Methodik und Ergebnisse

Abstract

Zusammenfassung: Es wird über den Competitive Ligand-Binding Assay (CLBA), einen Test zur Bestimmung von Thyroxin-bindendem Globulin (TBG) im Serum berichtet, der erstmals von Chopra et al. ((l 972), J. Clin. Endocrinol. Metab. 35,[565][566][567][568][569][570][571][572][573] beschrieben wurde. Die Bestimmung beruht auf der Verteilung einer konstanten Menge an markiertem Trijodthyronin (T 3 ) zwischen einer konstanten Menge an T 3 -Antikörpern und dem TBG des Serums, das zuvor durch Behandlung mit einem Anionenaustauscher (Amberlite IRA 400) von endogenem T 3 und T 4 freigemacht wurde. Der TBG-Gehalt von Normalpersonen beträgt 25,5 ± 5,0 mg/1 (x"± s x ); er ist signifikant erhöht bei Patienten mit Hypothyreose (36,8 ± 6,2 mg/1), bei Schwangeren (41,3 ± 6,4 mg/1) und signifikant erniedrigt bei Patienten mit Hyperthyreose (13,0 ± 4,0 rng/1). Kein Unterschied besteht zwischen Normalpersonen und Frauen, die Kontrazeptiva mit einem niedrigen Östrogenanteil einnehmen. Es besteht eine signifikante negative Korrelation zwischen TBG-Gehalt im Serum und dem relativen Anteil an freiem T 4 und freiem T 3 (r = -0,70, p < 0,001). Der niedrige TBG-Gehalt bei hyperthyreoten Patienten normalisiert sich allmählich unter thyreostatischer Therapie; die erhöhten TBG^Gehalte bei Hypothyreose fallen unter Substitutionstherapie in den Normbereich ab. Es zeigt sich eine Abhängigkeit der TBG-Konzentration vom Lebensalter. Mit zunehmendem Lebensalter kommt es zu einem signifikanten Abfall der TBG-Konzentration mit einem Minimum zwischen dem 20. und 50. Lebensjahr, danach erfolgt wieder ein signifikanter Anstieg auf die Ausgangswerte. Der CLBA-Assay ist eine einfache Routinemethode, die es ermöglicht, den TBG-Gehalt einer großen Anzahl an Serumproben genau und reproduzierbar zu messen. Der Vorteil gegenüber dem Radioimmunoassay für TBG liegt darin, daß eine Isolierung von TBG zur Antikörpergewin-nung und Markierung mit radioaktiven Isotopen, was zur Zeit noch mit erheblichen methodischen Schwierigkeiten verbunden ist, nicht erforderlich ist. Measurement of thyroxine binding globulin by competitive ttgand binding assay (CLBA)Summary: The competitive ligänd binding assay (CLBA) first described by Chopra et al. ((1972) J. Clin. Endocrinol. Metab. 35', 565-573) is a convenient routine method for the accurate measurement of thyroxine binding globulin in large numbers of serum samples. The assay is based on the partition of a constant quantity of radiolabelled T 3 between a fixed quantity of rabbit T 3 antibodies and the thyroxine binding globulin of the serum, after prior removal of T 3 and T 4 from the serum with an anion exchange resin (Amberlite IRA 400). In euthyroid subjects serum thyroxine binding globulin was 25.5 ± 5.0 mg/1, in hyperthyroid patients thyroxine binding globulin was significantly decreased to 13.0 ± 4.0 mg/1 and was significantly increased in hypothyroid patients to 36.8 ± 6.2 mg/1 as well as in pregnant women to 41.3 ± 6.2 mg/1. No difference was found between normal subjects and young women taking contraceptive puls wit...

Thyroxin-bindendes Globulin (TBG): Pr�paration, radioimmunologische Bestimmung und klinisch-diagnostische Bedeutung

“…LjM bindet, hat die Bindung des T 4 an Albumin (TBA) normalerweise keine große Bedeutung [15,34]. Die Serumkonzentrationen von TBG wurden bisher überwiegend indirekt mit Hilfe des T rin vitro-Test, der T 4-Bindungskapazität des Serums oder neuerdings des kompetitiven Radioligandenassays abgeschätzt [7,19,31,33]. Zur näheren Untersuchung der biologischen Bedeutung des TBG und zur quantitativen Überprüfung der mit indirekten Verfahren gewonnenen Kenntnisse über die Beziehung zwischen Gesamtschilddrüsenhormon-und 891 TBG-Spiegeln mußte zunächst eine spezifische, direkte Bestimmungsmethode für TBG aufgebaut werden.…”

“…Die Serumverdünnungskurven auch von Probanden mit quantitativen TBG-Varianten lagen sämtlich auf der Kalibrierstandardkurve, Hinweise auf eine Immunoheterogenität von TBG ergaben sich somit nicht. Bei der Ermittlung des Normalbereiches für TBG, der bei uns zwischen 15,0 und 31,0 mg/llag, fand sich eine sehr gute Überein-stimmung mit anderen Autoren [6,11,22,31]. …”

“…mit dem kompetitiven Radioligandenassay [7, 31] wurden für die Hyperthyreose niedrige und für die Hypothyreose höhere TBG-Spiegel im Vergleich zu Normalpersonen angenommen. Eine regulatorische Beziehung zwischen und TBG wurde diskutiert [5,17].…”