Avaliação Morfológica De Córneas De Coelhos Criopreservadas Com Etilenoglicol

Alves, Lorena Borges; Eurides, Duvaldo; Andrade, Lilian Vieira De; Silva, Luiz Antônio Da Franco Da Franco; Oliveira, Benito Juarez Nunes Alves de; Souza, Luiz Augusto de

doi:10.5216/cab.v12i2.11445

Cited by 1 publication

(3 citation statements)

References 0 publications

Supporting

Mentioning

Contrasting

Unclassified

Order By: Relevance

“…O desenvolvimento de produtos destinados ao uso humano, como medicamentos e cosméticos, possui uma criteriosa fase de testes que certificam a segurança para a utilização humana e quaisquer efeitos adversos que podem estar associados com tais produtos. (CAPELLA et al, 1965;ALVES et al, 2011;FOX et al, 2017). Porém, Vajta e Kuwayama (2006) destacam que os parâmetros a serem controlados podem ser altamente variáveis dependendo das espécies.…”

Section: Introductionunclassified

“…ser devido ao efeito tóxico do CPA que pode ter danificado o tecido, e consequentemente, aumentado a entrada de água. Nesse contexto, trabalhos prévios observaram que quando o CPA é mantido por período prolongado em contato com o tecido à temperatura ambiente, efeitos tóxicos ocorrem(CANALS et al, 2000;ALVES et al, 2011) visto que os tempos de equilíbrio do tecido com o CPA variam de 10 até 30 minutos. Nesse tempo mais curtos, os efeitos tóxicos são mínimos (VAJTA & KUWAYAMA, 2006).…”

unclassified

“…Essas substâncias têm a capacidade de formar ligação com as moléculas de água, tornandoa osmoticamente inativa, não participando da formação de cristais de gelo (ELLIOT & WANG & FULLER, 2017).O EG é uma substância usada para fins diversos como substância anticongelamento de radiadores de automóveis, asas de aviões, tintas, surfactantes e outros produtos(CARNEY & STICE, 2017). Esse CPA é amplamente usado por ter baixo peso molecular e baixo ponto de fusão, o que permite alta permeabilidade celular(CASTRO et al, 2011;CETINKAYA & ARAT, 2011;ALVES ET AL., 2011).…”

unclassified

See 2 more Smart Citations

Desenvolvimento de método de criopreservação de córneas para potencial aplicação em teste de permeabilidade e opacidade da córnea bovina (BCOP)

Onorato¹

View full text Add to dashboard Cite

Atualmente, ensaios biológicos devem ser utilizados para avaliação da segurança para a saúde de produtos antes de irem para o mercado. O teste de Permeabilidade e Opacidade de Córnea Bovina (BCOP) é um método alternativo ao uso de animais que utiliza córneas bovinas frescas para avaliar o potencial irritante e corrosivo de qualquer substância em nível ocular. A necessidade de sempre ter que usar córneas viáveis faz com que o escalonamento deste teste seja mais difícil. Para superar esse desafio, a criopreservação de córneas pode ser uma possibilidade para se ter bancos de córneas disponíveis em qualquer momento. Apesar do sucesso obtido no congelamento de córneas humanas, o processo de congelamento pode causar danos ao endotélio e em bovinos não são conhecidos protocolos eficientes para esse fim. O objetivo desse trabalho é desenvolver um método de criopreservação de córneas bovinas para aplicação no teste de BCOP. Inicialmente, as córneas foram criopreservadas em meio DMEM com os crioprotetores (CPA) dimetilsulfóxido (DMSO) e etilenoglicol (EG), em combinações com dois adjuvantes, albumina sérica bovina (BSA) e soro bovino (SB). O controle foi feito a partir de córneas frescas e córneas criopreservadas com DMEM e adjuvante. O ensaio de intumescência foi feito para verificar a resistência do endotélio aos CPAs. Posteriormente, elas foram congeladas em duas temperaturas: -20°C e -80°C. Após congelamento, foi realizada a análise macroscópica da opacidade corneana e viabilidade celular pelo método de exclusão com azul de tripan (AT). A área celular do endotélio e a morfologia das células foram avaliadas a partir de coloração com vermelho de alizarina (VA). Além disso, cortes histológicos corados com hematoxilina e eosina foram realizados para avaliar a integridade das diferentes camadas da córnea após a aplicação dos métodos de criopreservação estudados. Os dados de intumescência e viabilidade celular foram avaliados através de modelos lineares seguindo o critério de Akaike (AICc) e valores de R² (R² = 1 – erro relativo). Os resultados revelaram que as córneas só tiveram aumento de peso, significando um dano à camada endotelial, depois de 6 horas em contato com os CPAs (p < 0,05). Os tratamentos com CPAs foram diferentes do controle (p < 0,05) e os diferentes adjuvantes mantiveram o peso estabilizado, apresentaram diferença entre si (p < 0,05). O SB, que possui BSA em sua composição além de outras proteínas benéficas a criopreservação, foi escolhido como adjuvante para prosseguir o congelamento. A análise macroscópica revelou que o DMSO apresentou melhor transparência corneal. A viabilidade celular endotelial foi maior no tratamento controle, seguido por DMSO e EG, em ambas as temperaturas de congelamento. O congelamento em -20°C teve melhor resposta quando comparada ao -80ºC na viabilidade após criopreservação. Os danos do tratamento EG são evidenciados na análise morfológica e nas análises histológicas. Assim, os dados sugerem que o DMSO no congelamento tem potencial para a criopreservação de córneas bovinas, pois apresentou os melhores resultados nos parâmetros avaliados no presente trabalho. Adicionalmente, o congelamento em -20°C demonstrou potencial uso para a manutenção de córneas bovinas, com a vantagem de facilitar o armazenamento desses materiais em refrigeradores comuns.

show abstract

Section: Introductionunclassified

unclassified

See 1 more Smart Citation

Desenvolvimento de método de criopreservação de córneas para potencial aplicação em teste de permeabilidade e opacidade da córnea bovina (BCOP)

Onorato¹

View full text Add to dashboard Cite

show abstract

Avaliação Morfológica De Córneas De Coelhos Criopreservadas Com Etilenoglicol

Cited by 1 publication

References 0 publications

Desenvolvimento de método de criopreservação de córneas para potencial aplicação em teste de permeabilidade e opacidade da córnea bovina (BCOP)

Desenvolvimento de método de criopreservação de córneas para potencial aplicação em teste de permeabilidade e opacidade da córnea bovina (BCOP)

Contact Info

Product

Resources

About