Avaliação do potencial de Burkholderia sacchari produzir o copolimero biodegradável poli(3-hidroxibutirato-co-3-hidroxihexanoato) [P(3HB-co-3HHX)].

Mendonça, Thatiane Teixeira

doi:10.11606/d.42.2010.tde-25032010-154734

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“…Entretanto, os ácidos orgânicos de cadeia curta são geralmente tóxicos, não podendo ser oferecidos em altas concentrações. Além disso, no caso de R. eutropha e outras bactérias, a PHA sintase selvagem não é capaz de incorporar grandes frações de 3HV no copolímero (53)(54)(55).…”

Section: Controle De Composição De Phaunclassified

Controle da composição do copolímero P3HB-co-3HHx por indução gradativa da expressão dos genes phaA e phaB em Pseudomonas sp. LFM461.

Cespedes¹

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Section: Controle De Composição De Phaunclassified

Controle da composição do copolímero P3HB-co-3HHx por indução gradativa da expressão dos genes phaA e phaB em Pseudomonas sp. LFM461.

Cespedes¹

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“…Burkholderia sacchari apenas do monômero HB (hidroxibutirato) quando a fonte de carbono fornecida é um açúcar como a glicose ou a xilose (SILVA et al, 2004;MENDONÇA, 2009). Para todas as linhagens analisadas, nas duas condições de cultivo (xilose e mistura deste com glicose), observou-se um acúmulo de PHB correspondente a 50-60% da massa seca celular, sendo o acúmulo maior nas primeiras 24 horas, período em que também se observa maior consumo do substrato (anexos H-III e IV).…”

Section: Ensaios De Produção De Poli-3-hidroxibutirato Pelas Linhagenunclassified

Construção de bactérias recombinantes para produzir etanol e biopolímeros a partir de açucares derivados do hidrolisado do bagaço de cana-de-açúcares.

Freire¹

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Agradeço primeiramente a Deus por sustentar-me em minha caminhada. Agradeço a meus pais que sempre colocaram meus estudos em primeiro lugar e permitiram minha vinda para São Paulo. Obrigada pelo carinho e incentivo! Aos meus irmãos Radha Krishna e Endrigo Stêfanes pelo apoio e incentivo. Agradeço à FAPESP e à CAPES pelo apoio financeiro que auxiliou na minha pesquisa. Agradeço à orientação da Profa. Dra. Luiziana Ferreira da Silva e à co-orientação do Prof. Dr. José Gregório Cabrera Gomez a quem devo boa parte do aprendizado adquirido ao longo do meu trabalho. Agradeço também à Marilda Keiko Taciro pela orientação nas questões de engenharia bioquímica. Agradeço a meu companheiro André Luis Lopes Neves pelo apoio, paciência e carinho que me ajudaram na conclusão deste trabalho. Obrigada por compartilhar comigo noites a fio de experimentos infindáveis no laboratório. Agradeço aos que me ajudaram ao longo da caminhada: à equipe do laboratório, especialmente Daniela, pelas análises no HPLC e CG; Karen, Kelli, Karinna, Thatiane, Débora, Amanda e Rogério, que me auxiliaram nos experimentos e colaboraram com meu aprendizado. Obrigada pela disposição, paciência e amizade. Agradeço à equipe da Profa. Dra. Heloiza Ramos Barbosa, do Prof. Dr. Gabriel Padilla, do Prof. Dr. Beny Spira, do Prof. Dr. René Schneider e à equipe da Profa. Dra. Marilis do Valle Marques pela colaboração. Agradeço aos amigos que deixei em Natal, mas que até hoje guardo no coração: Larissa Klemig, Elizângela, Keith e Aleida. Agradeço também a Leonardo Nobre a quem devo em parte minha vinda a São Paulo e início do mestrado. Obrigada pelo apoio e incentivo! Palavras-chave: Xilose. Bactérias. Resíduos lignocelulósicos. Bagaço de cana-de-açúcar. Etanol. Polihidroxialcanoatos. Repressão catabólica. ABSTRACT FREIRE, R. K. B. Engineering recombinant bacteria to produce ethanol and biopolymers using sugars derived from sugarcane bagasse hydrolysate. 2012. 132f. [Masters thesis (Microbiology)] -Instituto de Ciências Biomédicas, Universidade de São Paulo, São Paulo, 2012.Lignocellulosic residues are remarkable substrates for biofuels production such as ethanol and for biopolymers such as polyhydroxyalkanoates (PHAs). The sugarcane bagasse has been indicated as the most promising raw material in Brazil due to increasing sugarcane production in this country. Xylose is one of the most important lignocellulose component, but its efficient utilization still represents a technical barrier. The aim of this work was to obtain bacterial strains more efficient in the xylose consumption. Multiple copies of the catabolism (xylAB) and transport (xylFGH) genes of xylose were introduced in the ethanol producer Escherichia coli KO11 strain and the poly-3-hydroxybutyrate (PHB) producer Burkholderia sacchari LFM 101. The recombinant strains were analysed for ability of xylose consumption and production in cultures containing xylose in the absence and presence of glucose. The inclusion of multiple copies of xylAB in E. coli KO11 reduced the rate of xylose consumption and increase...

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“…Burkholderia sacchari 101, anteriormente nomeada, tem a capacidade de acumular copolímero (P3HB-co-3HHx) quando suprida com acido hexanóico e glicose, foi observado um aumento de fracção 3HHx até 2 mol%, os ácidos octanóico e butírico não influenciaram nas fracções de 3HHx acumuladas pela bactéria (MENDONÇA, 2009).…”

Section: Regulação Da Produção De Phas a Nível Transcricionalunclassified

Caracterização do gene PHA sintase de bactérias isoladas a partir de amostras de solo.

Pinzón¹

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Os polihidroxialcanoatos (PHA) são poliésteres produzidos por microrganismos na forma de grânulos intracelulares, como fonte de carbono e energia. Estes materiais despertam um grande interesse biotecnológico, já que conferem propriedades termoplásticas e elastoméricas semelhantes aos plásticos sintéticos de origem petroquímica. Na biossíntese dos PHA, a PHA sintase é a enzima chave para sua produção e catalisa a incorporação de monômeros 3HA à cadeia polimérica. A partir de isolados bacterianos obtidos por Lício (2011) capazes de produzir Poli(3-hidroxibutirato) (P3HB). Estes isolados foram identificados pela análise da sequência dos genes rDNA 16S e pela construção de uma árvore filogenética como pertencentes ao gênero Burkholderia sp. Posteriormente, os genes da PHA sintase desses isolados foram clonados no plasmídeo pBBRMCS-2, e expressos em mutantes de Pseudomonas sp. (LFM461) e Burkholderia sacchari (LFM344), deficientes no acúmulo de PHA. As linhagens recombinantes foram cultivadas em excesso de glicose como fonte de carbono com o objetivo de avaliar o potencial da PHA sintase de incorporar monômeros (3HA) ao PHA. Foram realizados ensaios de acúmulo de PHA usando glicose como fonte de carbono, apresentando a produção de unidades de 3HB, 3HO e 3HD nas linhagens recombinantes de Pseudomonas sp. As linhagens recombinantes de B. sacchari incorporaram como único constituinte P(3HB). Ensaios de acúmulo de PHA foram realizados nas linhagens recombinantes de B. sacchari, usando como co-substratos diferentes ácidos graxos, sendo detectada a incorporação de unidades de 3HV e 3HHx além do 3HB, quando foram fornecidos acido hexanóico e valérico. Estes resultados indicam que as PHA sintases classe I são capazes de incorporar diferentes unidades monoméricas.

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Avaliação do potencial de Burkholderia sacchari produzir o copolimero biodegradável poli(3-hidroxibutirato-co-3-hidroxihexanoato) [P(3HB-co-3HHX)].

Abstract: MENDONÇA, T. T. Evaluating the potential of Burkholderia sacchari to produce the biodegradable copolymer poly(3-hydoxybutyrate-co-3-hydroxyhexanoate) [P(3HB-co-3HHx)]. 130 p. Master dissertation

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Controle da composição do copolímero P3HB-<i>co</i>-3HHx por indução gradativa da expressão dos genes <i>phaA</i> e <i>phaB</i> em<i> Pseudomonas sp</i>. LFM461.

Controle da composição do copolímero P3HB-<i>co</i>-3HHx por indução gradativa da expressão dos genes <i>phaA</i> e <i>phaB</i> em<i> Pseudomonas sp</i>. LFM461.

Construção de bactérias recombinantes para produzir etanol e biopolímeros a partir de açucares derivados do hidrolisado do bagaço de cana-de-açúcares.

Caracterização do gene PHA sintase de bactérias isoladas a partir de amostras de solo.

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