Avaliação do potencial biotecnológico de fungos endofíticos / Assessment of the biotechnological potential of endophytic fungi

Abstract

Os fungos endofíticos são reconhecidos por sua imensa capacidade de produção de metabólitos que atuam como antimicrobianos, além de serem produtores de diversas enzimas extracelulares. Assim, o objetivo deste trabalho foi avaliar a atividade antibacteriana e enzimática de fungos endofíticos da coleção de microrganismos do IFMT - Campus Avançado de Lucas do Rio Verde. Ao todo foram testadas doze linhagens de fungos endofíticos, isolados da raiz de Cyperus rotundus (tiririca) e da folha de Zea mays (milho). Para o teste de atividade antibacteriana, utilizou-se o método de difusão em ágar e a determinação da concentração inibitória mínima (CIM) contra bactérias patogênicas gram-positivas: Staphylococcus aureus 25923, Listeria monocytogenes; e gram-negativas: Escherichia coli 25922, Salmonella choleraesuis 10708, Helicobacter pylori 43504, Shigella flexneri 12022. Utilizou-se as seguintes linhagens de fungos: Lasiosphaeriaceae sp R2B, Lasiosphaeriaceae sp R8E, Talaromyces pinophilus FEFM I, Ceriporia alachuana R9C, Fusarium acutatum T9E, F. acutatum R7C, F. acutatumR5A, Trichoderma sp. R4A, Fusarium oxysporum T2A, F. oxysporum T7C e Fusarium solani T1A e uma linhagem não identificada R9B. Para o primeiro ensaio, discos miceliais (±7mm) foram retirados e situados em placas com meio Mueller-Hinton inoculado com bactéria patogênica padronizada a 0,5 da escala de McFarland. As placas foram incubadas a 37°C por 24 h e a atividade foi determinada de acordo com a formação de halos de inibição. A determinação da CIM foi realizada a partir dos extratos fúngicos liofilizados nas concentrações de 0,16 a 20,00 mg/mL em microplacas de 96 poços, incubados a 37°C por 24 h, lidas em espectrofotômetro a 450 nm e reveladas com resazurina. A atividade enzimática foi determinada para as enzimas amilase e protease mediante a formação de halos de degradação de seus respectivos meios. Na avaliação da atividade antibacteriana pelo teste de difusão em ágar, dez isolados (FEFM I, R9C, T9E, R4A, R7C, R9B, T2A, R5A, T1A, T7C) apresentaram atividade contra Helicobacter pylori e oito (R2B, R9C, T9E, R7C, R9B, T2A, R5A, T1A) contra Shigella flexneri, com destaque para o fungo R9C que apresentou atividade contra quatro cepas de bactérias patogênicas utilizadas: Salmonella choleraesuis, Helicobacter pylori, Shigella flexneri e Listeria monocytogenes. Nenhuma concentração dos extratos liofilizados testados inibiram o crescimento das cepas patogênicas. Quanto à atividade enzimática, quatro isolados apresentaram atividade positiva e quatro fortemente positiva para amilase, sete isolados com atividade fortemente positiva e três positivos para atividade proteolítica. Entre os gêneros de fungos utilizados, Fusarium foi o que apresentou maior potencial biotecnológico, já que apresentou atividade antibacteriana e enzimática promissoras.