Assays for Cyclic Nucleotides Including Clinical Applications

Coffey, Ronald G.

doi:10.1007/978-1-4615-7249-7_18

Cited by 8 publications

(2 citation statements)

References 147 publications

Supporting

Mentioning

Contrasting

Unclassified

Order By: Relevance

“…[31 j. and Coffey [6]. Activated T lymphocytes were suspended in RMPI 164(1 including 2 mM fresh i.-giutamine and 10 mg/ml BSA at a final concentralion of 15x 1()^ ceils/ml and incubated for W) min at 37°C before stimulation with IL-2, Normally, such incubations are conducted in the presence of 10% serum, but because human serum contains considerable amounts of cyclic nucleotides.…”

Section: Methodsmentioning

confidence: 99%

A Study of Cyclic Nucleotides as Second Messengers after Interleukin 2 Stimulation of Human T Lymphocytes

1987

View full text Add to dashboard Cite

Interleukin 2 (IL-2) was shown to induce a small but significant increase in the level of cGMP after 20 min stimulation and a subsequent fall after 1 h in activated T lymphocytes. No change in the level of cAMP was observed. Addition of the cyclic nucleotide analogues dbcAMP or dbcGMP did not stimulate DNA synthesis. On the contrary, IL-2-induced [3H]thymidine incorporation was inhibited by these drugs. Further, the phosphodiesterase inhibitor theophylline inhibited proliferation of activated T lymphocytes. Our results indicate that neither cAMP nor cGMP act as 'second messengers' for IL-2 but support the theory that cAMP is a negative regulator of cell proliferation.

show abstract

Section: Methodsmentioning

confidence: 99%

A Study of Cyclic Nucleotides as Second Messengers after Interleukin 2 Stimulation of Human T Lymphocytes

1987

View full text Add to dashboard Cite

show abstract

“…Реакцию останавливали через 3, 10 и 30 мин, внося по 0,5 мл 1,5 Μ НСЮ 4 и замораживая пробы при -20 °С. Содержание сАМР и cGMP в клетках определяли радиоиммунологически с соответствующими моноспецифическими антисыворотками пос-ле очистки cNMP на колонке с А1 2 0 3 , разделения сАМР и cGMP на колонках с Dowex 1X8 («Віо-Rad», США), ацетилирования образцов и стандартов и выражали в фмолях (cGMP) или пмолях (сАМР) на 1 мг белка, внося поправки на гашение образ-цов и потери при хроматографии, сравнивая с [ 3 Н]-меченными контролями [12]. Фраг-менты F(ab') 2 анти-μ были получены гидролизом козьих антител против белков мие-ломы МОРС 104Е (μ, λ) мыши.…”

unclassified

Mouse B lymphocyte activation of proliferation and cyclic nucleotides at early stages of activation

Komissarenko¹

1988

Biopolym. Cell

View full text Add to dashboard Cite

Введение. Несмотря на большое количество работ, посвященных акти-вации лимфоцитов, в настоящее время нет единого мнения о том, ка-кие из биохимических процессов являются важнейшими или уникаль-ными в передаче сигнала об активации клетки от ее поверхностной мембраны к ядру. Очевидно, что наряду с существованием на поверх-ности клетки большого разнообразия рецепторов для различных эф-фекторов и (или) дифференцировочных антигенов, набор которых опре-деляется соответствующей стадией созревания лимфоцитов, стимуляция клетки, ведущая к ее пролиферации и (или) дифференциации, осуществ-ляется за счет ограниченного количества синэргически или антагонис-тически взаимодействующих биохимических процессов. Поэтому отли-чающиеся эффекторные молекулы могут активировать общие для них биохимические пути в разные временные точки или одновременно, кон-курируя за них между собой. Среди важнейших событий, лежащих в основе или сопровождающих активацию лимфоцитов, сейчас выделяют следующие: увеличенный транспорт экзогенных ионов (прежде всего К + и Са 2+ ) в клетку [1]; активацию метаболизма мембранных фосфо-липидов, что может приводить к активации фосфолипазы С, гидролизу фосфатидилинозитолбисфосфата с образованием диацилглицерола, ак-тивирующего протеинкиназу С, и инозитолтрифосфата, способствующе-го освобождению и увеличению концентрации эндогенного кальция, а также повышению внутриклеточного рН [2,3], или же к активации фосфолипазы А2 и каскада арахидоиовой кислоты с образованием про-стагландинов, тромбоксанов и активацией гуанилатциклазы [4]; акти-вацию мембранных протеинкиназ, часть которых относится к белкам-продуктам экспрессии одной группы клеточных протоонкогенов [5], а также функционирование другой группы клеточных протоонкогенов, продукты экспрессии которых находятся в ядре и могут регулировать пролиферацию и дифференциацию клеток [6]. Уровни циклических нук-лсотндов и их соотношение в клетке имеют важное регуляторное зна-чение, в частности в отдельных фазах клеточного цикла [7], однако данные о роли сАМР и cGMP в стимулировании лимфоцитов остаются противоречивыми [8,9], хотя участие циклазных систем в пролифера-ции и(или) дифференциации многих типов клеток весьма очевидно [10]. Трудности в исследовании молекулярных механизмов активации лимфоцитов во многом связаны со сложностью этих механизмов, а так-же с отсутствием адекватных экспериментальных моделей, позволя-ющих иметь достаточное для биохимического анализа количество мате-риала. Цель настоящей работы заключалась в исследовании влияіїия разных эффекторов на активацию лимфоцитов и на содержание сАМР и cGMP в «ранние сроки» стимуляции этих клеток. В качестве модели активации лимфоцитов использовали выделенные В-клетки мыши, сти-мулированные F{ab f ) 2 -фрагментами антител против μ-цепей IgM мыши или липополисахаридом (LPS) Escherichia coli.

show abstract

Early Biochemical Events in T-Lymphocyte Activation by Mitogens

Hadden

Coffey

1990

Immunopharmacology Reviews

View full text Add to dashboard Cite

Assays for Cyclic Nucleotides Including Clinical Applications

Cited by 8 publications

References 147 publications

A Study of Cyclic Nucleotides as Second Messengers after Interleukin 2 Stimulation of Human T Lymphocytes

A Study of Cyclic Nucleotides as Second Messengers after Interleukin 2 Stimulation of Human T Lymphocytes

Mouse B lymphocyte activation of proliferation and cyclic nucleotides at early stages of activation

Early Biochemical Events in T-Lymphocyte Activation by Mitogens

Contact Info

Product

Resources

About