Aplicação da cromatografia líquida de alta eficiência para quantificação direta da 17

Abstract

A determinação dos níveis séricos de 17α-hidroxiprogesterona (17OHP) é essencial no diagnóstico laboratorial da hiperplasia adrenal congênita (CAH) por deficiência de 21-hidroxilase. Essa condição é responsável por pseudo-hermafroditismo em meninas INTRODUÇÃOA determinação dos níveis séricos de 17α-hidroxiprogesterona (17OHP) é essencial no diagnóstico laboratorial da hiperplasia adrenal congênita CAH por deficiência de 21-hidroxilase. Essa condição deve, idealmente, ser detectada precocemente, pois é responsável por pseudohermafroditismo no sexo feminino e, quando não tratada, por precocidade sexual em ambos os sexos.A 17OHP é um precursor esteróide produzido nas adrenais e também nos ovários, testículos e placenta. Além da sua importância no diagnóstico da CAH, sua mensuração é de valor diagnóstico na caracterização dos estados hiperandrogênicos e no estudo da infertilidade em mulheres.Na deficiência de 21-hidroxilase, como conseqüên-cia da deficiência de cortisol e ausência de feed-back negativo hipotálamo-hipofisário com elevação do ACTH, aumenta a produção de precursores esteróides, sendo a 17OHP o principal deles (Edwards,1975).A determinação deste esteróide em amostras bioló-gicas costuma ser feita por radioimunoensaio (RIA)

Determination of free urinary cortisol in cushing's syndrome using reversed-phase high performance liquid chromatography

“…Furthermore, its use in extraction of steroids is frequently mentioned in the literature. [18][19][20][21] No pH interference was observed in extraction recovery, once the relationship between F and T was maintained with the different pH values (0.91 ± 0.03). Replacing RIA by RP-HPLC allows a significant reduction in the total time of analysis, because the usually employed RIA methodology requires a minimum of 6 h for the incubation step.…”

“…In this study, a method was developed to quantify free F in urine using reversed-phase high-performance liquid chromatography (RP-HPLC) after liquid-liquid extraction 18,19 and using triamcinolone acetonide (T) as internal standard.…”