Analytical sensitivity of staining and molecular techniques for the detection of Cryptosporidium spp. oocysts isolated from bovines in water samples: a preliminary study

Díaz-Lee, A; Molina, Roberto; Dougnac, Catherine; Mercado, Rubén; Retamal, Patricio; Fredes, Fernando

doi:10.4067/s0301-732x2015000100015

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“…Del punto de vista analítico la sensibilidad de la tinción de ZN es variable, ya que se ha establecido como limite inferior de detección 8 y 22813 ooquistes/mL, en agua destilada inoculada artificialmente con ooquistes de Cryptosporidium sp. y material fecal de terneras diarreicas respectivamente (9,14). Con base en lo anterior, la alta proporción de individuos con cargas muy baja (50%) y baja (36.6%) presente pudo no haber sido detectada generando la aparición de falsos negativos.…”

Section: Discussionunclassified

Detección y caracterización molecular de Cryptosporidium spp. en terneros de lechería de la provincia de Valdivia, Chile

Muñoz¹

2021

Rev MVZ Córdoba

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Objetivo: Detectar ooquistes de Cryptosporidium spp. en terneros mediante tinción Ziehl Neelsen (ZN) y aplicar herramientas moleculares con los genes SSU18S rARN (SSU18S) y glicoproteína de 60 kDa (gp60), para caracterizar la especie y subtipos presentes en la provincia de Valdivia. Materiales y métodos: Se obtuvieron 275 muestras de heces de terneros menores de 2 meses de 15 predios lecheros de la provincia de Valdivia, las que fueron analizadas mediante tinción de ZN. Los resultados positivos se sometieron a PCR con genes target SSU18S y gp60, con posterior secuenciación. Resultados: 30 muestras fueron positivas a la tinción de ZN, el 46,6% (14/30) logró ser confirmado mediante PCR convencional para SSU18S y de éstas, sólo 42,8% (6/14) fueron positivas a la PCR convencional para gp60. La secuenciación arrojó la presencia de C. parvum en el 100% de las muestras y los subtipos IIaA15G2R1 (3/6), IIaA14G1R1 (2/6) y IIaA17G1R1 (1/6). Conclusiones: El subtipo IIaA15G2R1 fue el predominante, encontrándose en dos comunas de la provincia. El subtipo IIaA14G1R1 fue encontrado en dos predios pertenecientes a una misma comuna y su hallazgo es el primero en bovinos en Chile y el continente. Por ultimo, el subtipo IIaA17G2R1 ha sido encontrado esporádicamente en terneros al igual que el presente estudio. Las tres variantes han sido reportadas en humanos, sin embargo, no hay registros de estudios que caractericen los subtipos de C. parvum en sistemas de crianza de terneros y personal trabajador simultáneamente en Chile, por lo tanto, se requiere indagar mas en este tema.

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Section: Discussionunclassified

Detección y caracterización molecular de Cryptosporidium spp. en terneros de lechería de la provincia de Valdivia, Chile

Muñoz¹

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