Analysis and Quantitation of Minor Di‐ and Trisaccharides in Honey, Using Capillary Gas Chromatography

Abstract

Methodology is introduced to separate and quantitate most of the diand trisaccharides composed of glucose and fructose moieties, found in honey. At least twelve closely related disaccharides and seven trisaccharides were successfully identified and quantitated employing a combination of reduction and trimethylsilylation followed by either temperature programmed (disaccharides) or isothermal (trisaccharides) gas chromatography. The oligosaccharides in honey, representing approximately 3% of the total sugars, could be isolated using preparative HPLC and analyzed using the aforementioned gas chromatographic methodology. In addition, these oligosaccharides could also be analyzed without employing a preparative HPLC separation by using a concomitantly larger sample volume. Palatinose, not previously reported in honey, was found in many honey samples.

Bacterial sucrose isomerases: properties and structural studies

“…1) are structural isomers of sucrose and are naturally present in honey in very low quantities (Low & Sporns 1988). These natural sugars display a sweetening power, bulk, organoleptic and physical properties similar to those of sucrose (Takazoe 1989;Hamada 2002).…”

Glicídios no mel

“…A identificação inequívoca de oligossacarídios foi conduzida em um outro estudo, através da formação de octacetatos cristalinos, no qual a maltose, a nigerose, a isomaltose e a kojibiose (sugerida pela primeira vez como um dos oligossacarídios do mel) foram detectadas 59 . A presença de leucrose também já foi descrita 59 , porém, não foi confirmada em trabalhos subsequentes 18,19,31,60,61,62 . Um fracionamento em larga escala foi conduzido através do uso de coluna de carvão-celite, separação por cromatografia em papel e, em menor grau, por eletroforese em papel, revelação com reagentes específicos, identificação das osazonas características e, em alguns casos, obtenção de espectros na região do infravermelho 60,63 .…”

“…Estes autores identificaram 24 oligossacarídios, com a descrição pela primeira de vez de 2 β-dissacarídeos: gentiobiose e laminaribiose. A presença desses 2 dissacarídes foi confirmada em estudos subsequentes 18,61 . Em um trabalho, foi sugerida a presença de α,β-trealose (neotrealose) 60 , entretanto, nenhum outro autor detectou até o momento esse dissacarídeo no mel.…”

“…A identificação de oligossacarídios com resíduos de galactose (α-galactosídeos) tem sido motivo de controvérsia na literatura. Alguns autores não encontraram vestígios da presença de α-galactosídeos 13,18,60,61,63 . Apesar disto, a melibiose tem sido identificada por diferentes autores 23,56,62,65 .…”

“…Apesar disto, a melibiose tem sido identificada por diferentes autores 23,56,62,65 . A CG-DIC foi usada para o estudo de oligossacarídios do mel através da combinação das reações de redução com boroidreto de sódio e trimetilsililação com N-trimetilsililimidazol 61 ou formação de um derivado éter trimetilsililoxima dos glicídios a partir da reação com hexametildisilazano e hidroxilamina 31 . As maiores limitações para o uso desta técnica são: a formação de espécies tautoméricas dos glicídios redutores e a necessidade de formação de um derivado volátil do glicídeo.…”