Análisis de la presencia de mutaciones por pérdida de heterocigocidad de 1p/19q en tumores cerebrales de estirpe glial

Abstract

Objetivos. Analizar en tumores cerebrales, fundamentalmente de estirpe neuro-epitelial, la existencia de mutaciones en los cromosomas 1p y 19q por la técnica de análisis de la pérdida de heterocigocidad (LOH). Un primer objetivo implícito fue poner a punto la técnica del análisis. Método. Hemos investigado la existencia de mutaciones en 3 alelos seleccionados del cromosoma 1p y en 2 alelos del 19q de distintos tumores cerebrales de estirpe glial intervenidos de manera consecutiva en nuestro Centro desde Octubre de 2004 a Marzo de 2006. La metodología empleada ha sido la detección en ADN tumoral de tejido en fresco y en sangre del paciente del marcaje por PCR de amplificados y electroforesis analizando la pérdida de heterocigocidad de microsatélites, repeticiones de dinucleótidos, situados en D1S508, D1S2734, D1S199, D19S412 y D19S219. Resultados. Hemos incluido en esta primera fase de estudio un total de 45 muestras de pacientes intervenidos de tumores cerebrales supratentoriales de estirpe neuroepitelial y que incluyen: 29 glioblastomas, 1 gliosarcoma, 7 astrocitomas grado II, 1 oligoastrocitoma, 3 oligodendrogliomas, 1 oligodendroglioma anaplásico, 1 xantoastrocitoma, 1 tumor neuroepitelial disembrioplásico y 1 astrocitoma pilocítico. La presencia de mutación la hemos considerado cuando el índice alélico T1/ T2 era inferior a 0.8. Nl/N2 Por estirpe histológica destaca la presencia de mutación en un 80% de tumores oligodendrogliales, 14% de glioblastomas y 14% de astrocitomas fibrilares grado II. Conclusiones. La técnica de análisis de LOH en 1p/19q es factible de realizar en centros que dispongan de técnicas de estudios genético-moleculares, con un alto índice de fiabilidad. De su resultado se desprende qué pacientes se pueden beneficiar del tratamiento con alquilantes añadiendo, a la terapia quirúrgica y/o radioterápica en uso hasta la fecha, una posibilidad de tratamiento con alto porcentaje de respuestas. PALABRAS CLAVE: Tumores cerebrales. Gliomas. Mutación 1p/19q. Pérdida de heterocigocidad. Alquilantes. Allelic loss at 1p/19q analysis in brain tumors of glial lineage Summary Background. To analyze in cerebral tumors of neuroepithelial tissue 1p/19q codeletions by study of loss of heterozygosity (LOH). A first implied objective was to get ready this molecular thecnique. Methods. We aimed to determine several deletions mapping 1p and 19q chromosomes, three allelic loss of 1p and two allelic loss of 19q, in patients with cerebral tumors which were operated in our Deparment from October 2004 until March 2006. We have detected in blood and tumoral DNA loss of heterozygosity assay for molecular detection using PCR and capillary array electrophoresis of five markers (D1S508, D1S2734, D1S199, D19S412 y D19S219). Results. Were included in the first part of this study 45 sample of neuroepithelial tissue supratentorial tumors: 29 glioblastoma, 1 gliosarcoma, 7 diffuse astrocytoma grade II, 1 oligoastrocytoma, 3 oligodendroglioma, 1 anaplastic oligodendroglioma, 1 xanthoastrocytoma, 1 dysembryoplastic neuroepithelial...

Análisis de la codeleción 1p19q como marcador pronóstico en pacientes con glioblastoma primario.

“…Suelen tener fenotipos diferentes y cursos clínicos disímiles; desde la introducción de la inmunohistoquímica y el uso de la biología molecular tumoral, su diferenciación es más sencilla y permite seleccionar los tratamientos oncológicos 11 . La codeleción 1p19q se encuentra en la mayoría de los oligodendrogliomas, permitiendo subclasificar este tumor 11 ; resultados publicados por el Radiation Therapy Oncology Group (RTOG) y la European Organization for Research and Treatment of Cancer (EORTC) determinaron en pacientes con oligodendrogliomas y oligoastrocitomas anaplásicos que la pérdida parcial de los cromosomas 1 y 19 tiene un impacto significativo sobre la SG, hasta el punto de permitir caracterizar la enfermedad por su genotipo 2 .…”

“…Por otra parte, los cambios alélicos en el 1p y en el 19q solo se hallaron en 10 y 4 casos, respectivamente. Otro análisis que incluyó tumores gliales de 45 pacientes con tumores gliales supratentoriales documentó pérdidas por heterocigosidad en los cromosomas 1 y 19 en el 14% de los casos 2 .…”

“…También se han identificado algunos factores clínicos relacionados con la evolución de la enfermedad, entre los que cabe mencionar la edad temprana de presentación, el estado funcional al diagnóstico, el uso de quimioterapia adyuvante, la extensión de la resección y el estado de metilación de la metil-guanina-metil-transferasa (MGMT). Sin embargo, estas variables son insuficientes para definir el pronóstico de una neoplasia que presenta heterogeneidad genotípica 2 .…”

“…Con la aparición de nuevos marcadores moleculares, se ha podido caracterizar, al menos en parte, el comportamiento de los tumores cerebrales. El conocimiento progresivo de la génesis tumoral ha permitido comprender las vías implicadas en el desarrollo, progresión y cambio en la gradación de los tumores gliales de alto grado 2 . En los GB, se han encontrado alteraciones asociadas con la amplificación y sobreexpresión de los genes EGFR (epidermal growth factor receptor), CDK4 (cyclin-dependent kinase 4) y MDM2 (murine doble minute 2), además de la inactivación de varios genes supresores de tumor localizados en los cromosomas 9 (CDKN2A/ P16), 10p, 10q (incluyendo el gen PTEN/MMAC1), 13q, 17p (p53), 19q y 22q 3,4 .…”

“…Uno de los descubrimientos más importantes en la genética de los tumores cerebrales ha sido la diferenciación entre los oligodendrogliomas anaplásicos y los GB; en los primeros, se han documentado pérdidas alélicas en los cromosomas 1p y 19q (60% al 80% de los casos), como resultado de una translocación no balanceada t(1;19)(q10;p10) [5][6][7][8] , que se correlaciona con una mayor sensibilidad a los agentes alquilantes y a la radioterapia, eventos que permiten predecir la SG 2,9,10 .…”