Análisis de expresión de los genes AmpC y oprD en aislados clínicos 1 de Pseudomonas aeruginosa resistentes a betalactámicos en un hospital de tercer nivel en Ecuador

Abstract

ABSTRACT.-Innate and acquired antibiotic resistance mechanisms in Pseudomonas present a challenge for clinicians looking for timely and effective chemotherapy. This is particularly important in critical care hospital settings. This study is aimed at achieving a deeper understanding of two of the most important drug resistance mechanisms in Pseudomonas aeruginosa at the molecular level. One hundred clinical isolates of Pseudomonas aeruginosa were obtained from a tertiary level hospital in Quito, Ecuador. Expression of ampC and oprD was analysed through quantitative real-time PCR assays. A comparison between the ampC and oprD expression profiles and the phenotypes in antimicrobial susceptibility testing (AST) was conducted, with more than 50% of the isolates having concordant profiles for both ampC and oprD expression. Our results suggest that ampC and oprD expression might provide useful information about molecular resistance mechanisms in strains which are circulating in Ecuador. However, larger scale studies could clarify drug resistance mechanisms in order to guide targeted treatment.KEYWORDS: ampC, oprD, β-lactams, Pseudomonas aeruginosa, RT-qPCR. RESUMEN.-Los mecanismos innatos y adquiridos de resistencia a los antibióticos enPseudomonas representan un reto para los médicos que buscan una quimioterapia oportuna y eficaz. Esto es particularmente importante en las áreas de cuidados intesnsivos de los hospitales. Este estudio está dirigido a lograr una comprensión a nivel molecular de dos de los más importantes mecanismos de resistencia a los fármacos en Pseudomonas aeruginosa. Cien aislados clínicos de Pseudomonas aeruginosa se obtuvieron de un hospital de tercer nivel en Quito, Ecuador. Se analizó la expresión de ampC y oprD mediante PCR cuantitativa en tiempo real. Se realizó una comparación entre los perfiles de expresión ampC y oprD y los fenotipos obtenidos en la prueba de susceptibilidad antimicrobiana (AST), con más del 50% de los aislados con perfiles concordantes para la expresión ampC y oprD. Nuestros resultados sugieren que la expresión ampC y oprD podría proporcionar información útil sobre mecanismos de resistencia molecular en cepas que están circulando en Ecuador. Sin embargo, los estudios a mayor escala pueden aclarar los mecanismos de resistencia a los fármacos para establecer el tratamiento adecuado.

Analysis of Metallo-β-lactamases, oprD Mutation, and Multidrug Resistance of β-lactam Antibiotic-Resistant Strains of Pseudomonas aeruginosa Isolated from Southern China

“…Our study further provided evidence that oprD expression was reduced in the non-disruptive mutant isolates. Studies have suggested that more than 50% of isolates have consistent characteristics of MBL and oprD [20]. Our study also showed a similar trend of both impaired MBLs production and mutated oprD sequence, which further supported this opinion.…”