O leite é um alimento amplamente consumido pela população, sendo crucial que seja produzido em condições higiênicas adequadas e livre de contaminantes químicos de várias origens. O objetivo deste estudo foi testar a presença de resíduos de antibióticos em leite fresco proveniente de tanques de expansão municipais no Estado de Alagoas. Foram coletadas 42 amostras de leite em frascos estéreis de aproximadamente 50 mL. Essas amostras foram congeladas e enviadas para serem submetidas aos métodos oficiais de análise do Ministério da Agricultura. No laboratório, foram realizadas análises qualitativas de multi-resíduos em diferentes matrizes e determinação de resíduos de antibióticos beta-lactâmicos em leite bovino por cromatografia líquida acoplada à espectrometria de massas (LC-MS/MS). Em 95,2% (40/42) das amostras analisadas, não foi detectada a presença de resíduos de antibióticos; no entanto, em duas amostras (4,8%), a presença de resíduos foi detectada, mas em níveis que não puderam ser quantificados. As amostras estavam dentro dos limites estabelecidos pela legislação brasileira. Este estudo concluiu que não havia resíduos de antibióticos em níveis quantificáveis nas amostras analisadas. Portanto, sugere-se que esses antimicrobianos sejam monitorados no leite para garantir a ausência desses resíduos e assegurar um produto de qualidade, essencial para a saúde pública.