Análise do perfil lipídico do sêmen bovino

Abstract

DedicatóriaDedico, A meus pais, Vicente e Cirlene, pelo carinho, amizade e amor. Por serem responsáveis pelo que eu sou e por sempre acreditarem no meu sucesso.A minha irmã Ana Carolina pela sua amizade e incentivo, mesmo que por muitas vezes à distância. À Deus, por estar comigo em todos os momentos da minha vida. AgradecimentosÀ Universidade de São Paulo e ao Departamento de Anatomia dos Animais Domésticos e Silvestres, pela oportunidade de realização deste trabalho de pesquisa. Ao Prof. Felipe Perecin, pela oportunidade, pelo apoio e orientação. À CNPQ pela bolsa cedida, possibilitando a realização deste Mestrado. Aos meus pais, Vicente e Cirlene, pelo apoio e incentivo, à minha Irma Ana Carolina que torce por mim. À Dr. Christina Ramires Ferreira pela ajuda nas análises e obtenção dos espectros, pela disponibilidade e boa vontade em nos ajudar. Ao Laboratório Thomson do Instituto de Química da UNICAMP, pela realização das análises e pela obtenção das amostras. Ao Prof. Dr. Rubens Paes Arruda, pela colaboração com as amostras de sêmen para análise. A todos que, direta ou indiretamente, contribuíram para a realização deste trabalho. Palavras-chave: Lipídeos. Bovino. Espermatozoide. Espectrometria de massas.ABSTRACT FONSECA, M. A. Analysis of the lipid profile of bovine semen. [Análise do perfil lipídico do sêmen bovino]. 2012. 63 f. Dissertação (Mestrado em Ciências) -Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade de São Paulo, São Paulo, 2012. The membrane lipid composition is amongst the factors that influence the fertilization competence of the spermatozoa. It is also known that lipids play fundamental roles at spermatozoa membranes, participating in many processes, such as spermatozoaoocyte interaction and determining the physical-chemical behavior of spermatozoa membranes during cryopreservation. These molecules show a wide range of chemical properties, making complex its analysis. Currently, mass spectrometry (MS) through matrix-assisted laser desorption ionization (MALDI) represents a powerful tool for lipids analysis. Hence, this proposal aimed to evaluate differences in bovine spermatozoa lipid profile obtained through MALDI using direct sample analysis of spermatozoa or analysis of spermatozoa lipid extract obtained by Bligh-Dyer technique. Moreover, this proposal evaluated lipid profile of spermatozoa from bull that received or not antioxidant supplementation. After collection, washing and separation, the spermatozoa were submitted to lipid extraction or straightforward destined to lipid profile acquisition (direct method). The lipid profiles of spermatozoa lipid extracts or from whole spermatoloza were obtained by MALDI in positive mode with DHB matrix (dihydrozybenzoic acid). Data analysis was performed with Metaboanalyst software using multivariated analysis (Principal component analysis -PCA) and tools for identification of differential ions between comparison groups (t-test, volcano plot). Results show differences in spermatozoa lipid profile obtained by direct method or after lipid...