Análise da variabilidade genética de Alphitobius diaperinus utilizando marcadores moleculares de DNA

Abstract

ResumoAlphitobius diaperinus (Panzer, 1797) é uma espécie cosmopolita originá-ria do continente africano encontrada em grande quantidade em cama de frango, causando problemas sanitários e econômicos, afetando a saúde e o crescimento das aves e atuando também como transmissor de doenças. Indivíduos adultos de A. diaperinus foram coletados aleatoriamente de camas aviárias em três propriedades localizadas nos estados do Paraná, Santa Catarina e Rio Grande do Sul, analisados molecularmente por meio da técnica de RAPD. Para isso, foi adaptada uma metodologia para extração de DNA e testados os iniciadores decaméricos OPA-03, OPA-04, OPA-10, OPA-11 e OPA-13. O protocolo de extração de DNA que foi adaptado produziu fragmentos de DNA para a análise das populações de cascudinho, originárias da região sul do Brasil por RAPD. Foi encontrada alta variabilidade genética entre as populações de cascudinho. Além disso, sugere-se que indivíduos de A. diaperinus ocorrendo no Paraná possam ter se deslocado para os estados de Santa Catarina e Rio Grande do Sul. (VITTORI, 2007). O ciclo biológico do cascudinho está diretamente relacionado à temperatura (CHERNAKI et al., 2001). PalavrasUm aspecto importante no controle de pragas é o conhecimento de suas características fenotípicas e genotípicas. Esse conhecimento pode auxiliar no estabelecimento do perfil genético dos insetos e na identificação de marcadores que apontem para populações resistentes a inseticidas ou potencialmente transmissoras de doenças. A técnica de RAPD tem sido muito utilizada na obtenção de informações para a análise genômica, por apresentar características que permitem a obtenção de um grande número de informações para a análise de genomas, de cuja composição pouco se conhece a respeito. Essa técnica emprega a utilização de um único oligonucleotídio de sequência arbitrária, com potencial de reconhecer regiões desconhecidas do DNA alvo (WILLIAMS et al., 1990). Os marcadores RAPD se baseiam na amplificação do DNA, gerando simplicidade e rapidez a baixos custos. Assim, grande quantidade de polimorfismo e segmentos de DNA é obtida em curto espaço de tempo. Para que haja a amplificação de um fragmento RAPD, duas sequências de DNA complementares ao iniciador devem estar a menos de 4 kb | 57 Universitas: Ciências da Saúde, Brasília, v. 8, n. 2, p. 55-68, jul./dez. 2010 Análise da variabilidade genética de Alphitobius diaperinus utilizando ... e em orientação oposta, para permitir a amplificação pela Taq DNA polimerase (FERREIRA; GRATTAPAGLIA, 1998). Uma característica desse tipo de marcador é o seu comportamento como marcador genético dominante. Lembrando que a dominância, neste caso, não se refere à interação genética entre alelos de um mesmo loco e sim à interpretação relativa entre fenótipo e genótipo (CIAMPI; MA-GALHÃES, 2001). ObjetivoEstabelecer um protocolo de extração de DNA, obter perfis de marcadores moleculares RAPD e determinar a variabilidade genética entre indivíduos de A. diaperinus originários de três estados da região sul do Brasil.