Análise da capacidade de enraizamento in vitro de Calophyllum brasiliense utilizando marcadores RAPD

Abstract

ResumoMarcadores RAPD (Random amplified polymorphic DNA) são simples, eficientes, baratos e não requerem conhecimento prévio do genoma do organismo estudado, o que é particularmente importante para espé-cies nativas. O objetivo deste estudo é identificar marcadores moleculares que possam ser usados para caracterizar genótipos responsivos às auxinas usadas para induzir o enraizamento in vitro de explantes de guanandi (Calophyllum brasiliense). Amostras de DNA foram extraídas de folhas de plantas mantidas em casa de vegetação e plantas micropropagadas após a fase de enraizamento. Quatro primers foram usados e 26 loci encontrados, dois quais 21 são polimórficos (87.5%), com um número de alelos observado de 1.87 e efetivo de 1.39. A diversidade genética de Nei foi 0.24, valor similar ao encontrado em populações naturais. A substituição de nitrogênio líquido por armazenamento a -80°C por meia hora, com a adição de polivinilpirrolidona durante a maceração, foi efetiva na prevenção da degradação das amostras. Os resultados das análises sugerem uma interação entre o genótipo e a resposta à auxina usada durante a cultura in vitro, bem como a possibilidade de um grupo de plantas particularmente responsivo. Novas técnicas são necessárias para determinar a presença de um marcador que identifique genótipos mais suscetíveis ao enraizamento in vitro. Palavras-chave:Guanandi, cultura in vitro, marcador molecular, polivinilpirrolidona Abstract RAPD (Random amplified polymorphic DNA) markers are simple, efficient, inexpensive and do not require prior knowledge of the genome of the organism studied, which is especially important for native species. The objective of this study was to characterize molecular markers that may be used to identify genotypes responsive to the auxin used to induce the in vitro rooting of shoots of guanandi (Calophyllum brasiliense). DNA samples were extracted from leaves of greenhouse and micropropagated plants after the rooting phase. Four primers were used and 26 loci found, of which 21 were polymorphic (87.5%) with an average number of alleles observed of 1.87 and an effective number of 1.39. Genetic diversity using Nei's measure was 0.24, similar to the values of natural populations. The replacement of liquid nitrogen by storage at -80°C for half an hour, with the addition of polyvinylpyrrolidone during maceration, was effective in preventing the degradation of the samples. The results of the analyses suggest an interaction between the genotype and the response to the auxin used during in vitro culture, as well as the possibility of one particular group of responsive arrays. New techniques are needed to determine the presence of a marker that identifies some genotypes more susceptible to in vitro rooting.