ADAPTACIÓN DE CULTIVOS CELULARES SIN AMBIENTE DE CO2, DESCONGELACIÓN, MANTENIMIENTO Y ENSAYOS DE PLAQUEO VIRAL. v1

Abstract

Este método de cultivo celular es una adaptación para cultivo de líneas celulares eucariotas que tradicionalmente necesitan de una atmósfera de CO2 al 5% para su crecimiento; la presente adaptación se realiza con el fin de facilitar el crecimiento de líneas celulares eucariotas en laboratorios que presenten dificultad de acceso a CO2. Este método se basa en el protocolo descrito en 2005 por el Departamento de Virología, Centro Colaborador de la OPS / OMS para Enfermedades Virales, Instituto de Medicina Tropical "Pedro Kourí", La Habana, Cuba: "Improved Dengue Virus Plaque Formation on BHK21 and LLCMK2 Cells: Evaluation of Some Factors" Mayling Alvarez, Rosmari Rodriguez-Roche, Lídice Bernardo, Luis Morier and Maria G. Guzman! Department of Virology, PAHO/WHO Collaborating Center for Viral Diseases, "Pedro Kourí" Tropical Medicine Institute, Havana, Cuba. Este protocolo ha sido probado con éxito en las líneas celulares: HepG2, Huh-7, BHK, VERO, para ensayos de crecimiento/mantenimiento, congelación y ensayos de plaqueo viral. Este protocolo fue desarrollado gracias al apoyo administrativo de la CUE Alexander von Humboldt de Armenia en convenio con la Universidad del Quindío y desarrollado dentro de la ejecución de los proyectos: Desarrollo de una prueba de western blot para detección de antígenos virales de dengue serotipos 1–4 y Evaluación de la citotoxicidad y producción de citoquinas pro-inflamatorias (IL-1b, INF-y, IL-6, IL-10, TNF α) de leucocitos humanos que interactúan con liposomas cargados con siRNA contra el virus del dengue.