Over the past 6 years, next generation sequencing (NGS) has been established as a valuable high-throughput method for research in molecular genetics and has successfully been employed in the identifi cation of rare and common genetic variations. All major NGS technology companies providing commercially available instruments (Roche 454, Illumina, Life Technologies) have recently marketed bench top sequencing instruments with lower throughput and shorter run times, thereby broadening the applications of NGS and opening the technology to the potential use for clinical diagnostics. Although the high expectations regarding the discovery of new diagnostic targets and an overall reduction of cost have been achieved, technological challenges in instrument handling, robustness of the chemistry and data analysis need to be overcome. To facilitate the implementation of NGS as a routine method in molecular diagnostics, consistent quality standards need to be developed. Here the authors give an overview of the current standards in protocols and workfl ows and discuss possible approaches to defi ne quality criteria for NGS in molecular genetic diagnostics.Keywords: bioinformatics; genetic variation; Illumina; library preparation; Life Technologies; molecular genetics; molecular genetic diagnostics; next generation sequencing (NGS); rare diseases; Roche.
ZusammenfassungIn den vergangenen 6 Jahren hat sich " next generation sequencing " (NGS) als wichtige Hochdurchsatz-Methode f ü r die molekulargenetische Forschung etabliert und wurde erfolgreich zur Identifi kation seltener und h ä ufi ger genetischer Varianten eingesetzt. Alle gr ö ß eren NGS-Technologieunternehmen, die bisher kommerziell erh ä ltliche Ger ä te zu Verf ü gung stellten (Roche 454, Illumina, Life Technologies), haben vor kurzem auch "benchtop " -Ger ä te mit geringerem Durchsatz und k ü rzeren Laufzeiten auf den Markt gebracht, wodurch die Anwendungsgebiete erweitert und der Technologie der m ö gliche Einsatz in der klinischen Diagnostik er ö ffnet wurde. W ä hrend die hohen Erwartungen hinsichtlich der Entdeckung neuer diagnostischer Zielstrukturen und einer Senkung der Kosten erreicht wurden, m ü ssen etliche technologische Herausforderungen hinsichtlich Bedienung der Ger ä te, Robustheit der Chemie und Handhabung der Datenanalyse noch gemeistert werden. Um die Einf ü hrung von NGS in die Routinediagnostik zu erleichtern, m ü ssen nachhaltige Qualit ä tsstandards entwickelt werden. Im Folgenden geben die Autoren einen Ü berblick ü ber die gegenw ä rtigen Standards in den Protokollen und Arbeitsabl ä ufen und diskutieren m ö gliche Ans ä tze Qualit ä tskriterien f ü r NGS in der molekulargenetischen Diagnostik zu defi nieren.