A highly stereoselective in vitro cyclization of dolabellatriene diterpenes into novel dolastadienes

Eine chimäre pilzliche Diterpensynthase der Klade II‐D aus Colletotrichum gloeosporioides produziert Dolasta‐1(15),8‐dien

“…Sie kçnnen manchmal mit Enzymvarianten erhalten werden, in denen ein einzelner an der Reprotonierung beteiligter Aminosäurerest ausgetauscht wurde. [24] Da berichtet wurde,dass 2 durch milde Säurekatalyse leicht zu 1 reagiert, [14] sind wir auch der Frage nachgegangen, ob 1 ein echtes Enzymprodukt ist oder lediglich unter den Kultivierungs-bzw.I nkubationsbedingungen spontan aus 2 gebildet wird. Dazu wurde 2 sowohl mit als auch ohne CgDS in Inkubationspuffer umgesetzt.…”

“…B) Nummerierungder Kohlenstoffatome für 1 und 2 wie in Lit. [14] eingeführt. Diese Nummerierung wurde fürdie Lokanten zur Beschreibung der absoluten Konfigurationen nach CIP-Nomenklatur verwendet.…”

“…[12] Wiej üngst fürd ie Mangicdien-Synthase (FgMS) und die Fusariumdien/Fusagramineol-Synthase (FgFS) aus Fusarium graminearum gezeigt, kann durch eine Kombination aus metabolischem Engineering und "Genome-Mining" unter heterologer Expression ein Überproduktionsstamm erzeugt werden, der hohe Produktausbeuten liefert und eine schnelle Charakterisierung von TS ermçglicht. [14] Verbindung 1 ist also (5R,12R,14S)-Dolasta-1(15),8-dien, und Cgl13742 ist eine C.gloeosporioides-Dolasta-1(15),8-dien-Synthase (CgDS). Im Ergebnis wurde eine geringe Produktion des Diterpens 1 detektiert (Abbildung 1).…”

“…Weiterhin sind Amijiol (4), 14-Deoxyamijiol (5) und Isoamijiol (6)a us Braunalgen bekannt. [14] eingeführt. A) Cyclisierungsmechanismus fürCgDS.…”

“…Inkubation von Cgl13742 mit Geranyl-(GPP) und Farnesyldiphosphat (FPP) ergab kein Produkt, während die Inkubation mit DMAPP und IPP oder mit GGPP in der Bildung von 1 neben Spuren eines zweiten Diterpens 2 resultierte (Abbildungen 1u nd S5 Diese Verbindung war zuvor als das Produkt einer Behandlung des Naturstoffes (À)-d-Araneosen mit HCl in Chloroform bei À45 8 8Ce rhalten worden. [14] Verbindung 1 ist also (5R,12R,14S)-Dolasta-1(15),8-dien, und Cgl13742 ist eine C.gloeosporioides-Dolasta-1(15),8-dien-Synthase (CgDS). Weder 1 noch dessen Enantiomer sind als Naturstoff bekannt.…”