A Highly Sensitive and Rapid ELISA for the Arylurea Herbicides Diuron, Monuron, and Linuron

Schneider, P.; Goodrow, Marvin H.; Gee, Shirley J.; Hammock, Bruce D.

doi:10.1021/jf00038a033

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“…O apoio ao uso das metodologias imunoquímicas tem sido baseado em três pontos: i) alta sensibilidade alcançada por muitos imunoensaios, em alguns casos com limites de detecção abaixo de 0,1 µg L -1 para análises de águas e de alimentos 21 , e até níveis de 1 µg L -1 em outros tipos de amostras como solos e matrizes biológi-cas 22 ; ii) elevada especificidade, que torna os imunoensaios capazes de detectar, com exatidão, um determinado contaminante, mesmo na presença de outro que possua estreita similaridade química com este, e iii) extrema simplicidade operacional, com possibilidade de se analisar, de uma só vez, inúmeras amostras. Em resumo, as principais qualidades atribuídas aos imunoensaios incluem sensibilidade, especificidade, rapidez, simplicidade e baixo custo.…”

Section: Vantagens E Limitações Dos Ensaios Imunológicosunclassified

Métodos imunoquímicos para análise de contaminantes ambientais: conceitos, estado da arte e perspectivas

Nunes¹

2005

Quím. Nova

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Recebido em 6/2/04; aceito em 20/10/04; publicado na web em 28/2/05 IMMUNOCHEMICAL METHODS FOR ANALYSIS OF ENVIRONMENTAL CONTAMINANTS: CONCEPTS, STATE OF THE ART AND PERPECTIVES. Immunoassay techniques provide simple, powerful and inexpensive methods for analysis of environmental contaminants. However, the acceptance of immunoassays is dependent on the clear demonstration of quality and validity compared to more traditional techniques. In this review, primarily, the understanding and the fundamentals of immunoassay methods are given in order to make good use of immunoassays, especially of EIA tests. Special attention is given to the concepts related to the enzymelinked immunosorbent assay (ELISA) formats, such as inhibition concentration at 50% (IC 50 ), detection limit (LOD), cross-reactivity (CR %). It is also explained why some immunoassays are quantitative methods whereas others can only be used as screening methods. A list of main commercial kits for detection of priority pollutants is given in order to help analysts. Others formats, such as flowinjection immunoassay analysis (FIIA), immunoassay chromatography and immunosensors are also cited.Keywords: immunoassays; environmental contaminants; monitoring. INTRODUÇÃOA origem dos métodos imunológicos situa-se no final da déca-da de 50, quando Yalow e Berson 1 descreveram o primeiro ensaio imunológico para detectar insulina humana, o que lhes rendeu o Prêmio Nobel em 1977. A partir de então, as técnicas imunoquí-micas foram desenvolvidas como métodos de análise de macromoléculas (enzimas, hormônios), e posteriormente para moléculas orgânicas pequenas (drogas, fármacos), tendo seu maior êxito no campo da química clínica 2-4 . Em meados da década de 70, foi desenvolvido o primeiro ensaio biológico para pesticidas (aldrin e dieldrin) 5 . A este ensaio, seguiram-se outros, também baseados na marcação radioativa, chamados ensaios radioimunológicos ("radioimmunoassay, RIA"). Os ensaios imunoenzimáticos ("enzyme immunoassay, EIA") surgiram na década de 60 para identificação e localização de antígenos em preparações histológicas 2,6,7 , tendo sido a sua utilidade reconhecida posteriormente em outros campos distintos [8][9][10][11][12][13] . No início dos anos 80, começou-se a discutir as possibilidades que estes tipos de métodos analíticos podiam oferecer na detecção de contaminantes, tanto em amostras ambientais como de alimentos 12,14-16 , o que fomentou a sua aplicação no campo da química ambiental. A partir desse momento, começou-se a utilizar a marcação enzimática, que proporcionava menores riscos e apresentava sensibilidade similar aos métodos convencionais de análise 12,[15][16][17][18][19] . Inúmeras vantagens podem ser obtidas com a utilização dos métodos imunoquímicos e, paulatinamente, vão sendo disponibilizadas informações sobre diversos aspectos analíticos, tais como i) interpretação dos dados obtidos no desenvolvimento dos métodos; ii) estratégias utilizadas para a garantia da qualidade dos procedimentos operacionais; iii) análise dos dados e das informa...

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Section: Vantagens E Limitações Dos Ensaios Imunológicosunclassified

Métodos imunoquímicos para análise de contaminantes ambientais: conceitos, estado da arte e perspectivas

Nunes¹

2005

Quím. Nova

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“…3 ppm which was far below the maximum residue limit of IPC in potato tubers (50 ppm) in Japan. Table 2 shows the recovery of spiked IPC at [1][2][3][4][5][6][7][8][9][10][11][12][13][14][15][16][17][18][19][20] ppm.…”

Section: Assays In Potato Tubersmentioning

confidence: 99%

“…The development of enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for analysis of various pesticides and natural toxicants has been reported in recent years. [2][3][4][5][6][7] Chlorpropham (IPC, isopropyl 3-chlorocarbanilate) is a selective systemic herbicide, which is used in pre-emergence control of many annual grasses and some broad-leaved weeds in the fields. 8 IPC is also used as a post-harvest treatment for stored potato tubers to inhibit sprouting.…”

Section: Introductionmentioning

confidence: 99%

Immunoassay for the Herbicide Chlorpropham

Sadakane¹,

Sakai

Hayashi

et al. 1998

J. Pestic. Sci.

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“…290 Standard analytical methods for detecting diuron in water samples include mainly HPLC, [264][265][266] but also LC-MS, 267 GC/MS 268 and capillary electrophoresis. 269 Alternative techniques, such as ELISA tests using polyclonal, 150 or monoclonal 270 antibodies, fluoroimmunoassays, 271 and chemical immunosensors 272 …”

Section: Diuronmentioning

confidence: 99%

Screening methodologies for the determination of water contaminant residues by compact disk technology

Dobosz¹

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CERTIFICAN:Que el trabajo que presenta Paulina Dobosz, en esta memoria, con el título ResumenLa contaminación de aguas superficiales causada por plaguicidas y productos industriales es actualmente, uno de los grandes problemas medioambientales. Aunque estas sustancias están presentes a niveles muy bajos, tienen efectos perjudiciales en el medio en general y especialmente en humanos. Por este motivo, diferentes instituciones han regulado los niveles de contaminantes en áreas de controlar de la calidad de las aguas, creando listas prioritarias de sustancias peligrosas y tóxicas para el medio ambiente.Actualmente, la monitorización de los contaminantes incluidos en las listas oficiales se realiza mediante técnicas cromatográficas y espectrometría. Estos métodos analíticos están aprobados como técnicas de referencia para la determinación de residuos orgánicos presentes en aguas naturales. A pesar de ser técnicas fiables, reproducibles y sensibles, los métodos cromatográficos no están exentos de inconvenientes. Este tipo de metodologías requiere una instrumentación costosa y una laboriosa preparación de muestra, que hacen que el análisis sea en general complejo.Por ello, el desarrollo de métodos analíticos alternativos que faciliten hacer medidas in-situ a bajo coste y con gran capacidad de trabajo es de gran utilidad. En este sentido, las técnicas inmunoquímicas tienen un gran potencial analítico ya que son en general sensibles y selectivas, se pueden utilizar en el lugar de la toma de muestra y tienen capacidad multianalito.Esta tesis se ha centrado en el desarrollo de un sistema biosensor, basado en la tecnología de disco compacto, para la detección multianalito de diversos contaminantes prioritarios en aguas naturales.Las limitaciones más críticas para el desarrollo de un biosensor multianalito mediante métodos inmunoquímicos son los relacionados con su sensibilidad y selectividad. Por lo tanto, una parte importante de la tesis se ha centrado en la selección de inmunoreactivos, formato y optimización de diferentes parámetros claves del ensayo.Una estrategia utilizada para aumentar la sensibilidad de los ensayos ha consistido en marcar la inmunoreacción con nanopartículas de oro. Para ello, se ha estudiado diferentes tipos (esféricas y cilíndricas) de distinto tamaño y se han comparado sus prestaciones analíticas (relación señal ruido, sensibilidad etc.) También, se han desarrollado inmunoensayos cuantitativos sin necesidad de amplificación de la señal.Por otro lado, se ha desarrollado una aproximación que hemos denominado "inmunocaptura" basada en el uso de nanopartículas de oro como especie de captura de analitos en disolución y que actúa como marcador de la inmunointeracción que tiene lugar en la fase sólida.Finalmente, se han analizado muestras de agua naturales dopadas con distintos niveles de los analitos objeto de estudio para evaluar la utilidad de las metodologías desarrolladas como 8 herramienta de screening masivo en el área medioambiental. Los resultados obtenidos han sido comparados con los obtenidos...

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A Highly Sensitive and Rapid ELISA for the Arylurea Herbicides Diuron, Monuron, and Linuron

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Métodos imunoquímicos para análise de contaminantes ambientais: conceitos, estado da arte e perspectivas

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Immunoassay for the Herbicide Chlorpropham

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