A critical assessment of the synthesis and biological activity of p53/human double minute 2‐stapled peptide inhibitors

Abstract

Cytosolic and nuclear accumulation was not an intrinsic property of the stapled peptide, but resulted from capture by the target Hdm2 after endo-lysosomal release. Considering the rather poor uptake of stapled peptides, further development should focus on increasing the efficiency of uptake of these peptides.

Emerging Methods and Design Principles for Cell‐Penetrant Peptides

“…[108] Brock and coworkers showed that as eries of hydrocarbon-stapled Hdm2binding peptides were taken up similarly to their linear precursors. [125] Clearly,h elical structure does not guarantee efficient uptake.I nstead, the predominance of helical structures among cell-penetrant stapled peptides may reflect the intrinsic ability of a-helices to present amphipathic character and al arge,c ontinuous hydrophobic surface,w hich are required for efficient uptake. [126] Fore xample,arecent screen for cell-penetrant variants of an autophagy-inducing peptide was not biased for any specific secondary structure, yet it discovered ac ell-penetrant a-helix with an unusual staple configuration.…”

Neue Methoden und Designprinzipien für zellgängige Peptide

“…[172,173] Bei CAPA werden Zellen zunächst mit dem zu untersuchenden, Chloralkan-markierten Molekülg epulst, das bei Erreichen des Zytosols HaloTag kovalent blockiert. [125,[179][180][181][182] Die Entscheidung, wie ein Peptid zu modifizieren ist, um es intrinsisch zellgängig zu machen, hängt von seiner Grçße, Ladung und Hydrophobie ab.E in Peptid kann einem passiven Penetrationsmechanismus unterliegen, wenn es eher klein ist -d efiniert durch ein Molekülvolumen < 1500 3 entsprechend einem Peptid von < 1100-1200 Dalton. CAPA ist nicht markierungsfrei und weist daher alle Probleme der markierungsbasierten Assays auf,w ie sie oben beschrieben wurden.…”

“…[171] HaloTag ist eine modifizierte Halogenalkan-Dehalogenase,die von Wood und Mitarbeitern entwickelt wurde und mit schneller Kinetik und hoher Selektivitätd urch Chloralkane markiert wird. [172,173] Bei CAPA werden Zellen zunächst mit dem zu untersuchenden, [125,[179][180][181][182] Die Entscheidung, wie ein Peptid zu modifizieren ist, um es intrinsisch zellgängig zu machen, hängt von seiner Grçße, Ladung und Hydrophobie ab.E in Peptid kann einem passiven Penetrationsmechanismus unterliegen, wenn es eher klein ist -d efiniert durch ein Molekülvolumen < 1500 3 entsprechend einem Peptid von < 1100-1200 Dalton. [65,135] Füre ine passive Zellpenetration ist auch die Zahl der solvensexponierten Wasserstoffbrückendonoren begrenzt.…”

“…[108] Die am besten untersuchten Beispiele zellgängiger eingeschränkter Peptide sind diejenigen mit reinen Kohlenwasserstoffklammern. [125] Es wird deutlich, dass die Helixstruktur allein keine effiziente Zellaufnahme gewährleistet. [109] Die Zellpenetration war 4Stunden lang erhçht;d ie Aufnahme war bei 4 8 8Cg ehemmt, was auf einen endozytischen Aufnahmeweg hindeutet.…”

“…[108] Brock und Mitarbeiter fanden füre ine Serie von Kohlenwasserstoff-geklammerten HDM2-bindenden Peptiden eine ähnliche Zellaufnahme wie füri hre linearen Vorläufer. [125] Es wird deutlich, dass die Helixstruktur allein keine effiziente Zellaufnahme gewährleistet. Es scheint eher so,d ass die Häufung von Helixstrukturen unter den zellgängigen geklammerten Peptiden die intrinsische Fähigkeit von a-Helices widerspiegelt, amphipathische Eigenschaften und eine große,d urchgängige hydrophobe Oberfläche aufzuweisen, die füre ine effiziente Zellaufnahme nçtig sind.…”