Comparison of assays for the detection of West Nile virus antibodies in equine serum after natural infection or vaccination

Abstract

2West Nile virus (WNV) mainly infects birds, horses and humans. Outcomes of the infection range from light uncharacteristic signs to fatal neurologic disease. The main objectives of the present study were to measure serum IgG and IgM antibodies in naturally exposed and vaccinated horses and to compare results of hemagglutination-inhibition test (HIT), enzymelinked immunosorbent assay (ELISA) and plaque reduction neutralization test (PRNT).Altogether 224 animals were tested with HIT for WNV antibodies and 41 horses were simultaneously examined with ELISA and PRNT. After primary screening for WNV antibodies, horses were vaccinated. Samples were taken immediately before and 3-5 weeks after each vaccination. McNemar chi-squared and percent agreement tests were used to detect concordance between HIT, ELISA and PRNT.Analyses by HIT confirmed the presence of WNV antibodies in 27/105 (25.71 %) from naturally exposed horses. Sera from 57/66 (86.36%) vaccinated animals were positive before the first booster and from 11/11 (100%) before the second booster. HIT was less sensitive when detecting IgG antibodies. We could detect post vaccination IgM in 13 cases with MAC-ELISA and in 7 cases with HIT.WNV is endemic in Hungary causing regular natural infections. Protective antibodies could not be measured in each individual case 12 months after primary injections; protection is more reliable after the first yearly booster. Based on our findings it was not be possible to differentiate infected horses from recently vaccinated horses using IgM antibody capture ELISA (MAC-ELISA). HIT does not substitute ELISA or PRNT when detecting IgG, but was useful tool in this study to gain statistical information about the tendencies within a fixed population of horses.

Zika Virus: An Emerging Global Health Threat

“…Plaque-reduction neutralization tests (PRNT) and IgM ELISA are considered the gold standard for detection of flaviviruses (Maeda and Maeda, 2013 ; Joó et al, 2017 ). These assays have proven effective in a variety of outbreaks in the Pacific.…”

Infección reciente del virus del Oeste del Nilo en caballos del oriente de Yucatán, México

“…En este estudio también se identificaron dos caballos seroreactores sospechosos (1.1%), lo cual pudo deberse a que los títulos de IgM en estos animales no fueron lo suficientemente altos para alcanzar el punto de corte establecido en la MAC-ELISA y ser considerados positivos. Este hallazgo es habitual en hospederos con infecciones subagudas que se caracterizan por una titulación baja y por presentarse desde los cuatro hasta los diez días posteriores a la exposición inicial al virus (14,18). De igual manera, se ha descrito que la IgM puede persistir en niveles bajos hasta dos meses después de la primera exposición (14,19).…”

“…Este hallazgo es habitual en hospederos con infecciones subagudas que se caracterizan por una titulación baja y por presentarse desde los cuatro hasta los diez días posteriores a la exposición inicial al virus (14,18). De igual manera, se ha descrito que la IgM puede persistir en niveles bajos hasta dos meses después de la primera exposición (14,19).…”

“…Durante el periodo de muestreo, todos los caballos seleccionados fueron evaluados físicamente por el médico veterinario responsable, para identificar signos clínicos asociados a la infección con VON, tales como: fiebre, pérdida de apetito, estupor, debilidad muscular en las extremidades traseras, temblor muscular, irritabilidad, inestabilidad postural y trastornos del movimiento (4,14). Además, por cada caballo se obtuvo el historial clínico, proporcionado por el médico veterinario.…”

Vigilancia epidemiológica al virus del Oeste del Nilo en municipios del Departamento del Meta

“…La Elisa de captura utilizada en el estudio, es considerada una prueba confiable e indicativa de infección (33), aun así no se observó reactividad serológica frente al virus. Aunque se hubiesen encontrado reactores serológicos se ha sugerido tener una cuidadosa interpretación de los resultados, dada la estrecha relación antigénica con otros flavivirus que pudiesen estar circulando (46,47). En atención a esto, se cree que en las regiones de Colombia en donde el virus es endémico, las pruebas diagnósticas disponibles no han sido las más adecuadas, lo que limita el diagnóstico serológico especialmente donde circulan otros flavivirus (11,47,48) De otro lado, el uso de cebadores universales para flavivirus y no específicos para VNO, no invalida los resultados de este estudio, puesto que lo que se buscaba era su uso como prueba tamiz y el posterior uso de cebadores específicos frente a resultados positivos.…”