Avanços Na Criopreservação Do Sêmen Ovino I: Diluidores E Crioprotetores

Bittencourt, Rodrigo Freitas; Oba, Eunice; Filho, Antônio de Lisboa Ribeiro; Chalhoub, Marcos; Azevedo, H. C.; Bicudo, Sony Dimas

doi:10.5216/cab.v14i4.22964

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“…Através da literatura científica, fica claro que o glicerol é o crioprotetor mais utilizado e aceito para criopreservação de espermatozoide ovino (6,33,34) . Isso ocorre em decorrência de diversos fatores, dentre eles a composição da membrana plasmática dessa espécie, que possui elevada permeabilidade ao glicerol (2) , possivelmente relacionada às suas características químicas e peso molecular.…”

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“…Com o aumento do interesse comercial pela utilização da inseminação artificial (IA) nos programas de melhoramento genético, tem-se buscado o desenvolvimento de diluidores seminais melhorados (1) , os quais possibilitam o armazenamento do sêmen de animais por tempo indeterminado (2) , além de promover e difundir material genético de animais com alto valor zootécnico (3,4) . Entretanto, este é um processo complexo que envolve o equilíbrio de inúmeros fatores para obtenção de resultados satisfatórios (5,6) .…”

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“…Os agentes crioprotetores são essenciais para o congelamento de quase todos os sistemas biológicos (7) e devem ser adicionados aos diluentes para promoverem melhor sobrevivência espermática durante o processo de congelamento e descongelamento (5) . Desde a demonstração da sua eficácia (8) , o glicerol é o agente crioprotetor mais utilizado na confecção de meios diluidores para conservação de sêmen (9) e exerce função intracelular e extracelular (6) . No entanto, Fahy (7) afirma que a atividade crioprotetora atribuída ao glicerol é prejudicada pela redução da viabilidade da célula espermática e fertilidade pósdescongelação.…”

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Dimetilacetamida Associada Ou Não Ao Glicerol Para Criopreservação De Sêmen Ovino

et al. 2018

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Resumo O objetivo do presente estudo foi testar a dimetilacetamida (DMA) em diferentes concentrações, associada ou não ao glicerol (GL), sobre a viabilidade espermática do sêmen ovino congelado. Foram utilizados 10 ejaculados de dois carneiros adultos da raça Santa Inês. Os ejaculados foram divididos em sete grupos experimentais, respeitando o limite máximo de 5% de DMA, sendo eles: GL6%, DMA3%, GL5%+DMA1%, GL4%+DMA2%, GL3%+DMA3%, GL2%+DMA4%, GL1%+DMA5%. Os espermatozoides criopreservados nos diferentes tratamentos foram analisados quanto à cinética subjetiva, integridade estrutural da membrana plasmática (EOS), integridade funcional da membrana plasmática (CO) e morfologia espermática, observando defeitos totais (DT) e defeitos maiores (DM). A motilidade total (MT) e a progressiva (MP) pós-descongelação nos grupos GL5%+DMA1%; GL4%+DMA2% e GL3%+DMA3%, foram semelhantes (P>0,05) ao tratamento controle (GL6%). Destes, o diluidor GL4%+DMA2% foi o único que promoveu a manutenção da MT e MP pós-descongelação, quando comparado com o sêmen in natura (P>0,05). Não foram observadas diferenças significativas (P>0,05) para os parâmetros de EOS, CO, DT e DM nos diferentes grupos avaliados. A dimetilacetamida associada ao glicerol mostrou-se eficaz na manutenção da viabilidade espermática em ovinos, avaliada pós-descongelação. Entretanto, foi observado efeito deletério da DMA nas concentrações mais elevadas ou quando não esteve associada ao glicerol.

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Dimetilacetamida Associada Ou Não Ao Glicerol Para Criopreservação De Sêmen Ovino

et al. 2018

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“…Na espécie ovina, até o momento, os melhores resultados com a criopreservação espermática foram obtidos com o método de congelação convencional/clássica. No entanto, essa técnica ainda apresenta algumas limitações, sendo a formação de cristais de gelo intracelular a principal causa de danos aos espermatozoides durante o congelamento, provocando fragmentação no DNA e ruptura irreversível da membrana plasmática, reduzindo a motilidade dos espermatozoides após o descongelamento (3) . Novos métodos de criopreservação estão sendo desenvolvidos, na tentativa de obter resultados satisfatórios e visando contornar os problemas encontrados na congelação clássica, sendo a vitrificação uma das técnicas mais promissoras (4) .…”

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Uso da galactose na vitrificação de sêmen ovino em palhetas

et al. 2021

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Resumo A vitrificação de espermatozoides é uma técnica que apresenta grande potencial para criopreservação de material genético, e sua eficácia tem sido superior aos métodos convencionais em algumas espécies. No entanto, existem poucos estudos sobre sua eficiência com sêmen ejaculado de carneiros e o uso da galactose como crioprotetor extracelular durante a vitrificação. Objetivou-se com este estudo avaliar o efeito da galactose (0,01 M), associada ou não ao glicerol (3% e 7%), em meio comercial (Steridyl® - controle), na criopreservação de espermatozoides de carneiros pelo método de palhetas, comparando o método clássico de congelação e a vitrificação. Ejaculados de seis carneiros da raça Dorper em idade reprodutiva foram coletados com vagina artificial, aliquotados, diluídos individualmente (100 × 106 espermatozoides/mL) nos meios testados, envasados em palhetas de 0,25 mL e submetidos à congelação clássica ou vitrificação. Foram analisadas a cinemática, morfologia, morfometria, viabilidade, integridade física e funcional da membrana espermática. A congelação clássica obteve melhores resultados de motilidade total e progressiva do que a vitrificação nos quatro extensores testados, uma vez que as amostras vitrificadas não apresentaram motilidade pós-reaquecimento (p < 0,05). A adição de galactose ou glicerol ao meio comercial não trouxe efeito benéfico tanto para a vitrificação quanto congelação clássica.

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“…Dessa forma, diluidores alternativos a base de substratos de origem vegetal possibilita um maior controle microbiológico do produto (Bittencourt et al, 2013). E, a Bromelina (nome genérico dado ao conjunto de enzimas proteolíticas encontradas nas plantas da família Bromeliaceae) associada à ACPágua de coco em pó constituem-se como uma boa alternativa para a formulação de meios diluentes, substituindo os substratos de origem animal (Tap et al, 2016).…”

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Bioprospecção do extrato de bromelina acrescida de ACP® na qualidade do sêmen caprino

Nascimento

Teixeira

Macêdo

et al. 2021

RSD

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Objetivou-se avaliar o efeito do extrato de bromelina sobre a qualidade espermática, pós-descongelação na espécie caprina. Para tanto, foram utilizados cinco caprinos da raça Anglo Nubiana, com idade reprodutiva, clinicamente saudáveis. Foram realizadas colheitas de sêmen. Após a análise da concentração, o volume total do pool foi dividido em cinco grupos. Um pertencente ao grupo controle, composto de (ACP-101/102®) e quatro grupos experimentais com ACP-101/102® enriquecidos com extrato de bromelina nas concentrações de 5%; 10%; 15% e 20%. As amostras foram criopreservadas com auxílio do aparelho Tk3000®. Após o período de sete dias as amostras foram descongeladas e submetidas a avaliações pelo sistema CASA. Termo resistência, sondas fluorescente, teste cometa e teste de análise ultraestrutural de espermatozoides por meio de microscopia eletrônica de transmissão (MET). Na avaliação da cinética espermática pós-descongelação foi possível observar que os parâmetros motilidade espermática total, o grupo bromelina a 5%, se destacou dentre os demais, já na velocidade curvilínea e velocidade média da trajetória o grupo controle apresentou os melhores resultados. Quanto à integridade do DNA espermático as concentrações de bromelina (5%; 10%; 15% e 20%) não apresentaram diferença significativa em relação ao grupo controle, demonstrando que essa substância não apresenta genotoxicidade às células espermáticas. Na análise ultraestrutural o grupo bromelina a 5% demonstrou os melhores resultados. Nesse sentido, o extrato de bromelina adicionada a meios diluentes, visando à criopreservação, caracteriza-se como uma substância promissora, sobretudo da manutenção da integridade do DNA espermático. Contudo, mais estudos são necessários para a sua padronização.

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Avanços Na Criopreservação Do Sêmen Ovino I: Diluidores E Crioprotetores

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Dimetilacetamida Associada Ou Não Ao Glicerol Para Criopreservação De Sêmen Ovino

Dimetilacetamida Associada Ou Não Ao Glicerol Para Criopreservação De Sêmen Ovino

Uso da galactose na vitrificação de sêmen ovino em palhetas

Bioprospecção do extrato de bromelina acrescida de ACP® na qualidade do sêmen caprino

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