Optimización de la recuperación de Pseudomonas syringae pv. tabaci por la modificación de dos medios de cultivo

Abstract

RESUMENLos medios de cultivo, selectivos y semiselectivos, favorecen al aislamiento de las bacterias fitopatógenas, mediante la supresión de microorganismos no deseados. Para optimizar la recuperación de Pseudomonas syringae pv. tabaci, a partir de semillas de tabaco se emplearon dos medios de cultivo: KB (medio B de King et al.) y MSP ("modified sucrose peptone", medio de Mohan y Schaad), a los que fueron adicionados los antibióticos ciclohexamida y cefalexina. La eficacia de los medios se comprobó mediante siembra de una suspensión bacteriana y de semillas de tabaco infectadas, utilizando como testigo el medio KB sin drogas. Ninguno de los medios estudiados suprimió el crecimiento de la bacteria, mientras que los contaminantes presentes en las muestras, fueron reducidos en los medios con antibióticos dos o más veces, en comparación con el testigo. Las colonias de P. syringae pv. tabaci en el medio MSP modificado pudieron ser evaluadas a las 48 horas y mostraron una morfología fácilmente distinguible de las colonias contaminantes. Palabras clave: Nicotiana tabacum, fuego salvage, patología de semillas, métodos de detección. ABSTRACT Recovering optimization of Pseudomonas syringae pv. tabaci by use of two modified semiselective mediumSelective or semiselective medium increases the isolation of plant pathogenic bacteria, supressing undesirable microorganisms. Aiming optimize the isolation of Pseudomonas syringae pv. tabaci from tobacco seeds, two culture media were used: KB (King et al.'s medium B) and MSP ("modified sucrose peptone", Mohan & Schaad's medium), amended with cyclohexamida and cephalexin. The efficacy of both media was evaluated by plating bacterial suspension and seed extracts. KB without antibiotics was used as control. Any media suppressed bacterial growth, but eliminate contaminants, as high as two times when compared to the control. Bacterial colonies in modified MSP were evaluated 48 h after plating, showing a highly distinct aspect form those of contaminants.

Expression of a sphingomyelinase‐coding gene from Trichoderma harzianum conferred bacterial tolerance in tobacco

“…P . syringae was reisolated from lesions according to Stefanova et al (2009). Briefly, the edge of leaf lesions was cut and macerated in PBS.…”

“…photographed every 7 days and the images were used to measure the infected area using ImageJ software (imagej.nih.gov/ij/). P. syringae was reisolated from lesions according toStefanova et al (2009). Briefly, the edge of leaf lesions was cut and macerated in PBS.…”