Objetivo: Avaliar in vitro a ação antimicrobiana de materiais obturadores de canais radiculares de dentes decíduos por meio da difusão em ágar. Método: Os materiais testados foram: pasta Guedes-Pinto, pasta CTZ, OZE, Calen ® , L&C ® e MTA. Foi utilizada uma mistura microbiana composta por: Staphylococcus aureus-ATCC 6538, Enterococcus faecalis-ATCC 29212, Pseudomonas aeruginosa-ATCC 27853, Bacillus subtilis-ATCC 6633, Candida albicans-ATCC 10231. Foram utilizadas placas de Petri, contendo BHI ágar inoculadas com 0,1mL da mistura microbiana, nas quais foram confeccionadas cavidades no ágar, sendo estas preenchidas com as respectivas pastas. A leitura dos halos de inibição (mm) foi realizada após 48h/ 37ºC e os resultados submetidos aos testes Kruskal-Wallis e Mann-Whitney. Resultados: as pastas CTZ e Guedes-Pinto apresentaram halos de inibição estatisticamente maiores que os demais materiais (p<0,001). A L&C ® e o MTA não apresentaram halos de inibição. Conclusão: as pastas Guedes-Pinto, CTZ, Calen ® e o OZE apresentaram ação antimicrobiana por difusão. Dente decíduo; Tratamento do canal radicular; Microbiologia. Objective: To evaluate in vitro the antimicrobial action of root canal filling materials for primary teeth using the agar diffusion method. Method: The tested materials were Guedes-Pinto paste, CTZ paste, ZOE, Calen TM paste, L&C TM and MTA. A microbial mixture composed of the following microorganisms was used: Staphylococcus aureus-ATCC 6538, Enterococcus faecalis-ATCC 29212, Pseudomonas aeruginosa-ATCC 27853, Bacillus subtilis-ATCC 6633 and Candida albicans-ATCC 10231. Petri dishes containing BHI agar inoculated with 0.1 mL of the microbial mixture were used. After solidification of the culture medium, wells were prepared and immediately filled with the respective pastes. The diameter (mm) of the zones of microbial growth inhibition formed around the wells was measured after 48 h at 37ºC and the results were analyzed by the Kruskal-Wallis and Mann-Whitney tests. Results: The CTZ and Guedes-Pinto pastes presented significantly larger microbial growth inhibition zones than the other materials (p<0.001). L&C TM and MTA did not present inhibition zones. Conclusion: The CTZ, Guedes-Pinto and Calen TM pastes and ZOE cement presented antimicrobial action by diffusion. Deciduous tooth; Root canal therapy; Microbiology.