Quantificação laboratorial de cobre sérico por espectrofotometria Vis comparável à espectrometria de absorção atômica com chama

Abstract

Introdução: O cobre é um nutriente essencial para os humanos, e a manutenção dos seus níveis é importante, uma vez que seu metabolismo está envolvido com estresse oxidativo e patologias, como a Doença de Wilson. Neste trabalho, um método de espectrofotometria visível (espectrofotometria Vis) foi validado, aplicado em indivíduos jovens e comparado com espectrometria de absorção atômica com chama (EAA-chama). Métodos: Concentrações séricas de cobre foram medidas por EAA-chama e por espectrofotometria Vis, através da reação de cobre com batocuproína, λ = 484 nm. Curvas analíticas em solução aquosa e com adição de padrão foram efetuadas para verificar linearidade, recuperação e precisão do método espectrofotométrico. Amostras de sangue de 12 indivíduos (média de idade 22 anos) foram analisadas por ambos os métodos e comparadas entre si. Os resultados foram expressos em média ± desviopadrão. Resultados: As curvas com adição de padrão e aquosa (n = 5) apresentaram coeficientes de regressão superiores a 0,99 e de variação inter e intradia inferiores a 15%. Os valores de cobre sérico encontrados para o método espectrofotométrico foram 1,17 ± 0,39 e 0,73 ± 0,14 mg/l para mulheres e homens, respectivamente. Para EAA-chama foram encontrados 1,13 ± 0,43 e 0,59 ± 0,13 mg/l para mulheres e homens, respectivamente. Os resultados mostraram correlação de Pearson significativa (r = 0,946; p < 0,05). Os níveis séricos de cobre foram significativamente maiores em mulheres do que em homens (p < 0,05). Conclusão: O método espectrofotométrico visível demonstrou ser linear, reprodutível e aplicável, oferecendo uma alternativa confiável à quantificação de cobre por EAA-chama. Além disso, é uma técnica simples, rápida e barata, que pode ser utilizada na rotina laboratorial clínica.

Possíveis efeitos do cobre sanguíneo sobre parâmetros hematológicos em idosas

“…O cobre (Cu) é amplamente distribuído na natureza e é considerado um elemento traço essencial (32) , o qual atua em diversas funções fisiológicas e bioquímicas (30) , sendo constituinte de muitas metaloproteínas e metaloenzimas (5) . Para a população em geral, a maior parte deste micronutriente é obtida da dieta, por legumes, carnes, frutos secos e bebidas, inclusive água (49) .…”

“…É um metal redox fortemente ativo, predominantemente encontrado na forma de íon cúprico (Cu II), podendo também apresentar-se na forma de íon cuproso (Cu I) no interior das células (30) . Esta capacidade redox é o que o torna útil em diversas etapas da geração de energia.…”

“…Mas é também o que lhe permite catalisar, quando em seu estado "livre", a geração de espécies reativas de oxigênio (ROS) que são prejudiciais ao organismo (7) . Cerca de 85% a 95% do cobre estão ligados covalentemente a ceruloplasmina sérica (7) , por isso sua quantificação é realizada preferencialmente no soro na maioria dos estudos (30) .…”

“…Há diversos trabalhos demonstrando que o cobre é cofator de enzimas (20) como superóxido dismutase (SOD) (30) , lisil oxidase (11) , citocromo c oxidase e ceruloplasmina (40) . Estudos experimentais em animais têm mostrado que a deficiência de cobre pode reduzir significativamente a atividade da lisil oxidase nos ossos, prejudicando a formação de colágeno e elastina.…”

“…Além disso, a maioria das doenças neurodegenerativas tem sua origem em reações com radicais livres ou espécies reativas (38,46) . A elevação de cobre também causa toxicidade relacionada com a peroxidação lipídica de membranas, uma vez que, quando encontrado na forma monovalente (Cu I), o metal está disponível para transferir um elétron, gerando, assim, espécies reativas de oxigênio (EROS), como radicais hidroxila, peróxido de hidrogênio e íons superóxido, que estão intimamente ligados ao estresse oxidativo, provocando dano celular, oxidação proteica e danos ao DNA (30) .…”