Influência do fibrinogênio bovino na adesão e agregação eritrocitária

Abstract

A presença de algumas macromoléculas no sangue esta associada a fenômenos de hiperviscosidade sangüínea e hiperagregação eritrocitária, quadro freqüente em algumas patologias (Diabetes, Hipertensão Arterial,etc). Este estudo investiga a agregação eritrocitária e sedimentação em amostras de sangue suíno, humano e bovino utilizando duas técnicas experimentais. O sangue humano e o de suínos agregam naturalmente formando roleaux enquanto o sangue bovino não agrega. A microestrutura foi investigada por microscopia óptica em amostras de sangue bovino (hematócrito 40%), suíno (hematócrito 1%, 5%, 10%, 30% e 40%) e humano (hematócrito 40%) e amostras de sangue bovino (hematócrito 40%) com adição de fibrinogênio nas concentrações de 5g/l, 10g/l, 20g/l, 25g/l e 30g/l. Os ensaios no Leitor de Microplacas foram realizados para se determinar o comportamento da agregação eritrocitária e sedimentação do sangue em função do hematócrito com e sem adição de fibrinogênio (para o sangue bovino). A microscopia óptica de luz transmitida permite a caracterização das microestruturas do sangue sob diferentes condições experimentais. Com o Leitor de Microplacas é possível distinguir-se três regiões no processo: a-Região I onde ocorre a agregação eritrocitária; b-Região II onde ocorre à predominância da etapa de sedimentação dos eritrócitos; e c-Região III onde ocorre um aumento lento da absorbância ocasionado também pela sedimentação dos eritrócitos. Associando a microscopia óptica com o Leitor de Microplacas é possível criar parâmetros para quantificar o processo de agregação e sedimentação do sangue, ferramentas úteis no diagnóstico e evolução de patologias que afligem tanto seres humanos como animais.Palavras chaves: Agregação eritrocitária, fibrinogênio, adesão. ABSTRACTThe presence of some macromolecules in the blood is associated with blood hiperviscosity and hyperaggregation. We have studied erythrocyte aggregation and blood sedimentation on samples of swine, human and bovine blood. Bovine blood does not present erythrocyte aggregation while human and swine blood naturally aggregates at low shear rates and at stasis. The action of different bovine fibrinogen concentrations on the microstructure of bovine blood was analyzed and compared with swine and human blood. The phenomena were investigated using optical microscopy (to analyze blood microstructures) and Microplate Reader to measure absorbance (at a fixed wavelength, λ=655nm) versus time(s). Experiments were performed using samples of bovine blood (hematocrit 40%), swine blood (H= 1%, 5%, 10%, 30% and 40%) and human blood (H= 40%); and samples of bovine blood (H= 40%) with the addition of bovine fibrinogen at different concentrations (5g/l, 10g/l, 20g/l, 25g/l and 30g/l). Using the Microplate Reader it was possible to distinguish three regions in the process: a-The region I where the erythrocyte aggregation occurs; b-region II where the sedimentation process is predominant and c-Region III where a very slow increase indicates that the persistence of sedimentation process. The a...

Revista na Íntegra

“…Fez sua residência em Paris (França), por influência do pai, que gostaria de mantê-lo longe da política. (MARCONDES, 1926). Casou-se com sua prima por parte de mãe, Zulmira Alves de Araújo Pancada (?-?…”

Doseamento microbiológico de vancomicina - desenvolvimento e validação de método empregando leitura cinética em microplacas

“…As microplacas têm sido uma ferramenta padrão de procedimentos em laboratórios de pesquisa analítica e diagnósticos clínicos. Empregos usuais das mesmas ocorre nos testes imunoenzimático ELISA (MARTINS et al, 2005e SILVA et al, 1988, ensaios para diagnóstico de doenças (MARTINS et al, 2007), biologia molecular (BORISEVICH et al, 2008e MAYO & CURNUTTE, 1990, estudo de atividade biológica (BARRET et al, 1997;HOLOWACHUK et al, 2003e LEHTINEN et al, 2006, ensaios microbiológicos (FOLLY & MACHADO, 2001e PETTIT et al, 2005) e quantificação de endotoxina bacteriana em produtos farmacêuticos (STUBBINGS et al, 2004). Os sistemas de microplacas com modo de leitura cinético e a análise de grande número de amostras em menor tempo com segurança e precisão.…”