Caracterização molecular do sistema de grupo sangüíneo Dombrock em uma população brasileira

Abstract

ResumoO sistema de grupo sangüíneo Dombrock é constituído por um par de antígenos antitéticos, Do a e Do b e três antígenos de alta freqüência populacional, Gregory (Gy a ), Holley (Hy) e Joseph (Jo a ). O gene DO, que codifica os antígenos do sistema Dombrock, foi recentemente clonado e suas bases moleculares foram elucidadas. Os antígenos Do a e Do b , são controlados pelos alelos DOA e DOB, que estão associados à troca de três nucleotídeos no exon 2 do gene DO: 378C/T, 624T/C e 793A/G, respectivamente. O fenótipo Jo(a-) está associado com a substituição 350C/T, que caracteriza o alelo JO. O fenótipo Hy-negativo está associado à presença de um dos alelos: HY1 ou HY2. O alelo HY2 é caracterizado pela substituição 323G/T. Uma substituição adicional 898C/G, no exon 3, caracteriza o gene HY1. Recentemente, dois novos alelos do gene DO foram descritos: DOB-SH (378C, 624C, 793G) e DOA-HA (378T, 624T, 793A). Considerando que as bases moleculares dos antígenos Dombrock foram elucidadas; que novos alelos têm sido descritos; a miscigenação da população brasileira e que, até o momento, nenhum estudo foi realizado sobre a freqüência dos genes Dombrock na nossa população, nós analisamos 450 amostras de DNA, através das técnicas de PCR-RFLP e Microarrays® -HEA Beadchip, com a finalidade de determinar a freqüência dos alelos DO (DOA, DOB, HY1, HY2, JO). Dois novos alelos foram identificados baseados em novas combinações de SNPs: alelo DOB-WL (793G, 898G, 323G) e alelo DOA-SH (378C, 624C, 793A). Nossos dados demonstram uma grande complexidade e heterogeneidade dos alelos Dombrock na população brasileira e confirmam a necessidade do estudo molecular em diferentes populações. AbstractThe molecular basis of the Do a and Do b polymorphisms are associated with three single-nucleotide polymorphisms (SNPs) on exon 2 of the DO gene: 378C>T, 624T>C and 793A>G, the DOA and DOB alleles. The SNPs 350C>T (JO allele) and 323G>T (HY allele) are associated with: Jo(a-) and Hy-negative phenotypes. Recently, two new DO alleles were identified using microarray technology, DOB-SH (378C, 624C, 793G) and DOA-HA (378T, 624T, 793A). Although the molecular background of the Dombrock system is well defined, no studies have been carried out in the Brazilian population.We used PCR-RFLP based assays and a microarray assay to determine the frequency of the DO alleles (DOA, DOB, HY1, HY2 and JO) in Brazilians. We tested the DNA of 288 individuals by PCR-RFLP to determine the 793A>G (DOA/DOB), 323G>T (HY), 350C>T (JO) and 898C>G (HY1/HY2) SNPs. We also tested DNA from 162 blood donors using HEA Beadchip TM (BioArray Solutions, USA) to determine the 378C>T, 624T>C, 793A>G (DOA/DOB), 350C>T (JO allele) and 323G>T (HY) SNPs.Two novel allelic combinations were found in our samples: the 793G SNP (DOB allele) associated with 898G and 323G (DOB-WL) and the 378C, 624C, 793A and 323G (DOA-SH) SNPs. We also found the recently reported DOB-SH and DOA-HA alleles.Our data demonstrate the high heterogeneity of DO alleles in the Brazilian population and highlight the impo...