Método para a Determinação de Ácidos Fenólicos na Parede Celular de Forragens

Abstract

RESUMO -Há fatores que limitam a digestão das forragens tropicais e estão associados à dinâmica dos ácidos fenólicos da parede celular. Os estudos destes compostos em forragens podem ser facilitados pela disponibilidade de métodos sensíveis que permitam o processamento de grande número de amostras. No presente trabalho, descreve-se um método para a determinação de ácidos fenólicos na parede celular de forragens, utilizando cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE). Bagaço de cana, capim-elefante e folhas de mandioca foram utilizados como amostras experimentais. Para remover substâncias solúveis de baixa massa molecular, foram testados etanol 80% e o detergente neutro, determinando seus efeitos sobre a recuperação das moléculas e benefícios no perfil cromatográfico. Para a obtenção dos ácidos fenólicos livres, as amostras foram solubilizadas em NaOH 1 mol/L, 20 o C por 24 horas. O método proposto foi adequado para a determinação de ácidos fenólicos, apresentando grande sensibilidade e produtividade no laboratório. Para minimizar os efeitos negativos da formação de sal resultante da neutralização ácida do extrato alcalino, sugere-se a diluição da amostra ou a injeção de pequeno volume (5 uL) no aparelho. O efeito da utilização de solventes como etanol 80% ou detergente neutro é distinto sobre as amostras das gramíneas e leguminosas. A quantidade de extrativos nas folhas de mandioca foi superior a do bagaço de cana e capim-elefante. A concentração de ácidos fenólicos foi pouco alterada pela ação dos solventes, sendo maior nas amostras de bagaço de cana e capim-elefante, em relação às folhas de mandioca. O método apresentado constitui-se em uma importante ferramenta para o estudo dos ácidos fenólicos na parede celular de forragens tropicais.Palavras-chave: ácido ferúlico, ácido p-cumárico, CLAE, lignina, parede celular vegetal Method for Phenolic Acid Determination in Forage Cell WallABSTRACT -Factors that limit the digestion of tropical forages are associated to the dynamic of cell wall phenolic acids. The study of these compounds in forages may be facilitated by the availability of sensible methods that permit processing large amounts of samples. The present paper describes a method for determining phenolic acids in forage cell wall through high-performance liquid chromatography (HPLC). Sugar cane bagasse, elephant grass and cassava leaves were used as experimental samples. To remove soluble low molecular weight products, ethanol 80% and neutral detergent were essayed to determine their effects on the recovery of molecules and other benefits to chromatography profile. The sample solubilization with NaOH 1 mol/L, 20 o C for 24 hours, was used to obtain the free phenolic acids. The method described proved appropriate showing great sensibility and lab productivity. To minimize the effects of salt formation as a consequence of acid neutralization, sample dilution and reduced injection volumes (5uL) are suggested. The action of ethanol 80% and neutral detergent differ between grasses and legumes. The amount of ex...

Caracterização morfo-anatômica do colmo de genótipos de milho

“…As variedades bm3 tendem a apresentar menor diâmetro de colmo quando comparados com genótipos ou híbridos normais tanto de milho como de sorgo (Anglade et al, 1992;Baucher et al, 1998 (Jung, 1989). Porém, outros efeitos podem estar envolvidos, como arranjo, espaçamento e composição da parede celular (Jung, 1989;Argillier et al, 1996;Álvares de Brito et al, 1999;Mechin, 2000;Mechin et al, 2005;Deschamps e Ramos, 2002).…”

Caracterização morfo-anatômica do colmo de genótipos de milho.

“…As variedades bm3 tendem a apresentar menor diâmetro de colmo quando comparados com genótipos ou híbridos normais tanto de milho como de sorgo (Anglade et al, 1992;Baucher et al, 1998) (Jung, 1989). Porém, outros efeitos podem estar envolvidos, como arranjo, espaçamento e composição da parede celular (Jung, 1989;Argillier et al, 1996;Álvares de Brito et al, 1999;Mechin, 2000;Mechin et al, 2005;Deschamps e Ramos, 2002).…”

Allelopathy and Allelochemicals of Eragrostis plana (Poaceae) and its Relation with Phenology and Nitrogen Fertilization

“…Phenolic compounds may, in turn, be in a higher or a lower concentration, depending on the physiological age of the plants. As these compounds are directly involved in the association of the lignin with the hemicellulose from the cell wall (Deschamps and Ramos, 2002), the increase of its concentration in plants is commonly observed in advanced phenological stages.…”