Soroneutralização e imunofluorescência utilizando anticorpos monoclonais no diagnóstico rápido de infecções pelo herpesvírus bovino tipos 1 e 5 (BHV-1 e BHV-5)

Abstract

Anticorpos monoclonais (AcMs) produzidos com uma amostra brasileira do herpesvírus bovino tipo 5 (BHV-5) foram utilizados na adaptação e padronização de técnicas rápidas para o diagnóstico de infecções pelo BHV-1 e BHV-5. A detecção de antígenos virais por imunofluorescência em células descamativas (IFCD) foi comparada com o isolamento viral, em secreções nasais de 16 bezerros, sendo 6 inoculados com o BHV-1 e 10 com o BHV-5. De 203 amostras testadas, 182 (89,6%) apresentaram resultados concordantes nos dois testes (143 positivas; 39 negativas). Comparando-se com o isolamento, a IFCD apresentou sensibilidade de 96,6%, especificidade de 70,9%, e precisão de 89,6%. Os AcMs também foram utilizados para detectar antígenos do BHV-5 em impressões frescas do cérebro de bezerros acometidos de enfermidade neurológica e em células de cultivo utilizadas na técnica de soroneutralização (SN), permitindo a obtenção dos resultados em 24 horas. A técnica, denominada de soroneutralização rápida (SNR), apresentou sensibilidade de 97,3%; especificidade de 95,5% e precisão de 96,2% em comparação com a SN tradicional; e sensibilidade de 94,7%, especificidade de 97,3% e precisão de 96,1% em comparação com um ELISA comercial. Esses resultados demonstram que esses AcMs podem ser muito úteis para uso em técnicas rápidas de diagnóstico de infecções suspeitas de BHV-1 ou de BHV-5, sobretudo em situações de surto, quando a tomada de decisões adequadas depende de um diagnóstico rápido e confiável.

Meningoencefalite por herpesvírus bovino-5

“…No entanto, são descritos surtos de meningoencefalite por BoHV-5 em rebanhos de raças zebuínas com índices de mortalidade e letalidade tão altos quanto os descritos em rebanhos de raças européias (Salvador et al 1998, Colodel et al 2002. Alguns autores relatam que apesar da ampla distribuição de BoHV-1 no rebanho bovino brasileiro, a prevalência de infecções por BoHV-5 não é bem documentada, devido à dificuldade de diferenciação sorológica entre BoHV-5 e outras amostras de herpesvírus (BoHV-1) remetidas aos laboratórios de diagnóstico e à variedade individual das diversas cepas estudadas em várias regiões do país Rissi et al 2006 casos naturais de meningoencefalite , Kunrath et al 2004, Hübner et al 2005b). …”

“…No entanto, deve-se procurar confirmação pelo isolamento do vírus por detecção de antígenos virais em seções do encéfalo ou em células descamativas presentes nas secreções nasais (d´Offay et al 1995, Kunrath et al 2004. As alterações histopatológicas no SNC, mesmo sem a presen-ça de inclusões, são características o suficiente e permitem um diagnóstico de rotina em casos onde os exames virológicos não sejam possíveis.…”

“…As técnicas confirmatórias incluem o isolamento do vírus do encéfalo ou de secreções nasais (d´Offay et al 1995) e identificação do agente por anticorpos monoclonais (Roehe et al 1997, Kunrath et al 2004. A caracterização de BoHV-5 (e sua diferenciação do BoHV-1) pode ser realizada por reatividade diferencial com alguns anticorpos monoclonais antiBoHV-1 (Roehe et al 1997) ou por reação específica com anticorpos monoclonais anti-BoHV-5 , Kunrath et al 2004.…”

Avaliação do extrato etanólico de casca de Punica granatum (romã) na diminuição da replicação viral do BoHV-1 Colorado em embriões murinos experimentalmente infectados

“…(Singh et al, 1982;Stringfellow et al, 1990;Palazzi, 2010), pois são limitados ao meio externo dos embriões Givens, 2000), não tendo efeito aos patógenos que já se encontram dentro das células, segundo inúmeros ensaios in vitro (Palazzi, 2010). Dentre os diversos patógenos com relevância, os herpesvírus bovinos configuram entre os agentes com distribuição mundial e importância econômica significativa (Colodel et al, 2002;Kunrath et al, 2004). São inúmeras as doenças causadas pelos herpesvírus: rinotraqueíte infecciosa bovina (IBR), conjuntivite, vulvovaginite pustular infecciosa (IPV), balanopostite pustular infecciosa (IPB), reabsorção embrionária, aborto, infertilidade temporária, nascimento de animais fracos e infecções sistêmi-cas que podem resultar em meningoencefalite (Cerqueira et al, 2000;Vieira et al, 2003 …”

A Retrospective Search for Bovine Herpesvirus 5 (Bohv-5) in the Brain of Cattle Affected by Neurological Disease in Rio De Janeiro State

“…Positive (cell monolayers inoculated with a BoHV-1/5 positive material) and negative controls (cells inoculated with MEM) were included in all experiments. Cell monolayers showing characteristic CPE and those not showing CPE at the end of the fifth passage were submitted to indirect fluorescence antibody assay (IFA), using the above described Mabs as primary antibody, according to protocols described elsewhere (Kunrath et al 2004). Mock-infected MDBK cells and cells infected with standard BoHV-1 (Cooper) and A-663 (BoHV-5) strains were used as negative and positive controls, respectively.…”