Introdução de genes em segmentos foliares de cupuaçu (Theobroma grandiflorum schumm.) usando biobalística

Abstract

A técnica da biobalística foi utilizada com o objetivo de adaptar um protocolo para transformação de plantas de cupuaçu. Segmentos foliares de cupuaçu foram bombardeados com um plasmídio contendo o gene reportador da antocianina, utilizando-se as pressões de hélio de 650, 1000 e 1100psi. Após o bombardeamento, os explantes foram transferidos para meio MS por 24 horas e, após este período de incubação, pontos vermelhos foram detectados utilizando-se um estereomicroscópio Stemi SV11 Zeiss (Germany). A expressão do gene da antocianina foi observada nas pressões de 650 e 1000psi, entretanto necroses foram encontradas na pressão de 1100psi. Demonstrou-se que os genes C1 e R’ da síntese de antocianina, sob o controle do promotor 35S, podem ser utilizados como repórteres para o monitoramento dos eventos de transformação em cupuaçu.

Árvores geneticamente modificadas: técnicas, aplicações, riscos e os potenciais impactos associados a sua utilização

“…Ferreira et al (2004), trabalhando com cupuaçu, (Theobroma grandiflorum), utilizaram gás hélio como propulsor em diferentes pressões, concluindo ser um mecanismo eficiente para a transferência de genes para essa cultura, desde que a pressão esteja entre 650 psi e 1.000 psi. Quoirin et al (2002) utilizaram a biobalística para transferência de genes em duas espécies de acácia (Acacia sp.…”

Efeito adjuvante de esporos de Bacillus subtilis coadministrados a vacinas de DNA.

“…Duas vacinas de DNA que codificam proteínas híbridas encontram-se atualmente em ensaio clínico e codificam a proteína E7 fusionada à proteína HSP70 de Mycobacterium tuberculosis (pNGVL4a-Sig/E7(detox)/HSP70) ou à CRT (calreticulina) (pNGVL4a/E7(detox)/CRT) e são inoculadas pela via intramuscular ou intradérmica, respectivamente (MA et al, 2010 A técnica da biobalística, também conhecida por bombardeamento de partículas, foi descrita inicialmente em 1987 (SANFORD et al, 1987). O método consiste na aceleração de micropartículas que atravessam a parede celular ou a membrana plasmática, de forma não letal, carregando substâncias adsorvidas, como DNA, RNA ou proteínas para o interior da célula (FERREIRA et al, 2004). O processo não necessita de um pré-tratamento do tecido a ser transfectado e requer quantidades muito pequenas da substância de interesse.…”

Cultura de tecidos e transformação genética com o gene Ddm1 no estudo do silenciamento de elementos de transposição em cana-de-açúcar

“…Elementos de transposição (TEs) são caracterizados como pequenos segmentos de DNA que se movem dentro do genoma e estão presentes desde bactérias até eucariotos (BENNETZEN et al, 2000). Estes elementos compõem grande parte do genoma dos eucariotos e podem corresponder entre 50% a 80% do DNA nuclear em algumas espécies de gramíneas (FESCHOTTE et al, 2002).…”

“…Os elementos da classe II são caracterizados pelas repetições terminais invertidas (TIR) e por codificarem a enzima transposase (Tpase), cuja atividade é responsável pela excisão e inserção do elemento (FESCHOTTE et al, 2002).…”