Avaliação de testes de ELISA para o diagnóstico sorológico de infecções pelos sorotipos 3, 5 e 7 de Actinobacillus pleuropneumoniae em suínos

Abstract

Compararam-se dois antígenos no teste de ELISA para o diagnóstico sorológico dos sorotipos 3, 5 e 7 de A. pleuropneumoniae prevalentes no Brasil. Um compunha-se da fase aquosa da extração fenólica de suspensão bacteriana (FAF) e o outro de lipopolissacarídeos de cadeia longa (LPS-CL). Com esses antígenos foram padronizados ELISAs monovalente e polivalente para os sorotipos prevalentes no Brasil. Com os resultados dos testes de um conjunto de amostras de soro de suínos livres de infecção para A. pleuropneumoniae e um conjunto de amostras de soro obtidas de leitões inoculados com os sorotipos citados e que apresentaram soroconversão, determinaram-se as equações discriminantes para os conjuntos de soros e compararam-se os testes quanto à distância generalizada de Mahalanobis, ao coeficiente de determinação, ao teste F, ao coeficiente global, à sensibilidade e à especificidade. Na análise desses parâmetros observou-se que o antígeno FAF foi superior. Com o ELISA PFAF reações positivas não esperadas foram observadas com animais inoculados com os sorotipos heterólogos 2 e 9, não observadas com o PLPS-CL. A sensibilidade dos testes polivalentes ficou entre 91,5 e 95,7% com especificidade similar, indicando que ambos os testes são adequados para triagem sorológica uma vez que detectam os sorotipos 3, 4, 5, 6, 7 e 8.

Otimização da técnica da PCR para a detecção de Actinobacillus pleuropneumoniae

“…As tonsilas foram extraídas de dois suínos Specific Pathogen Free (SPF) negativos no teste de ELISA para antígeno lipopolissacarídeo cadeia longa (LPS-CL) polivalente para os sorotipos 3, 5 e 7 de A. pleuropneumoniae (MACHADO et al, 2001). Tais tonsilas apresentaram resultados negativos no isolamento bacteriológico tradicional (IBT) e na PCRcpx para A. pleuropneumoniae sem etapa de pré-enriquecimento.…”

Padronização da técnica de nanopartícula de ouro não modificada (AuNPs) para detecção de Actinobacillus pleuropneumoniae em pulmões de suínos

“…Testes indiretos são muito utilizados (Machado et al 2001, Shin et al 2011, Eamens et al 2012a,b, GimenezLirola et al 2014,para detecção simultânea de anticorpos para toxinas com sensibilidade de 82,7% e especificidade de 100% (Gimenez-Lirola et al 2014). São descritos testes de ELISA monovalentes e polivalentes para sorotipos, com sensibilidade e especificidade variando de 88,3% a 96,6% (Machado et al 2001).…”

“…São descritos testes de ELISA monovalentes e polivalentes para sorotipos, com sensibilidade e especificidade variando de 88,3% a 96,6% (Machado et al 2001). A importância de alta sensibilidade e especificidade em testes diagnósticos é fundamental para monitoramento dos rebanhos.…”

“…O contágio geralmente ocorre após inalação de aerossóis ou contato direto, o microrganismo inalado coloniza o tecido pulmonar aderindo-se ao muco, proteínas e a células hospedeiras com posterior multiplicação no local (Chiers et al 2010). O monitoramento do status da doença em rebanhos, o controle e a erradicação são de fundamental importância devido a características de contágio rápido deste agente, para impedir que animais portadores sejam introduzidos em rebanhos saudáveis (Tremblay et al 2013).Testes indiretos são muito utilizados (Machado et al 2001, Shin et al 2011, Eamens et al 2012a,b, GimenezLirola et al 2014,para detecção simultânea de anticorpos para toxinas com sensibilidade de 82,7% e especificidade de 100% (Gimenez-Lirola et al 2014). São descritos testes de ELISA monovalentes e polivalentes para sorotipos, com sensibilidade e especificidade variando de 88,3% a 96,6% (Machado et al 2001).…”