Análise da pureza genética e discriminação de cultivares de vinca (Catharanthus roseus (L.) G.Don) usando "random amplified polymorphic DNA" em DNA extraído de sementes e folhas

Abstract

A técnica "Random Amplified Polymorphic DNA" (RAPD) surgiu como uma ferramenta útil para testar a pureza genética e a discriminação de cultivares em muitas espécies. É uma técnica simples, rápida, relativamente de baixo custo e permite o uso de DNA extraído de sementes secas, o que é muito importante em um programa de análise de sementes. O uso desta tecnologia no teste da pureza genética pode ser muito interessante para algumas espécies, como a vinca (Catharanthus roseus (L.) G.Don), pois pouco se conhece a respeito da seqüência de seu DNA. É interessante, também, pelo fato de existir grande número de "primers" comercialmente disponíveis, que podem ser prontamente utilizados para gerar dados. Essa técnica pode ser mais facilmente utilizada para gerar padrões de bandas polimórficas suficientes para discriminar genótipos diferentes. Todavia, no presente estudo, os padrões RAPD de bandas obtidas de amostras de DNA extraído de sementes de vinca em "bulk" foram não-consistentes, o mesmo ocorrendo com o uso de DNA extraído de sementes individuais de um mesmo cultivar, o que evidencia que a técnica não é aplicável para testar a pureza genética e a discriminação de cultivares de vinca. Entretanto, os padrões de bandas RAPD gerados a partir de DNA extraído de tecido foliar de plântulas foram mais reproduzíveis e poderiam ser considerados na caracterização de cultivares.

Agrupamento de acessos e cultivares de três espécies de <em>Brachiaria</em> por RAPD

“…As espécies de Brachiaria tem alta produção de matéria seca, apresentam excelente resposta a fertilizantes, são perenes, e permanecem verdes mesmo durante os períodos de baixos índices pluviométricos. Os valores nutricionais indicam alta palatabilidade, o que proporciona aos animais altos níveis de ingestão (Ndikumana e Leeuw, 1996).…”

“…Caracteres moleculares revelam diferenças genéticas mais rapidamente, com maior precisão e sem o obscurecimento causado pelo efeito ambiental, oferecendo vantagens significativas em termos de discriminação, confiabilidade, rapidez e custo reduzido (Assis et al, 2003). Uma técnica relativamente nova, o RAPD (Random Amplified Polymorphic DNA) (Williams et al, 1990), tem sido adotada por alguns pesquisadores envolvidos no desenvolvimento de métodos de identificação de cultivares (Weeden, 1992;Menezes et al, 2002), principalmente por ser uma técnica simples que não requer nenhuma informação prévia sobre sequências de nucleotídeos do genoma da espécie, além de ser bastante acessível Acta Sci. Agron.…”

Assessment of genetic diversity in Cattleya intermedia Lindl. (Orchidaceae)

“…Among the various types of molecular markers available, Random Amplified Polymorphic DNA (RAPD) is a methodology that does not require previous genome knowledge, it is cheap and accessible especially when molecular information is scarce (Williams et al, 1990;Weeden, 1992). It has been used to indicate genetic relationships between orchid species (Demeke et al, 1992;Choi et al, 2006), to unravel cultivar identification (Weeden, 1992;Menezes et al 2002), to study the systematic of Vanda (Lim et al, 1999) and Phalaenopsis (Goh et al, 2006) and to analyse the genetic diversity as in Cymbidium (Choi et al, 2006), Changneienia amoena (Li and Ge, 2006) and Cypripedium calceolus (Brzosko et al, 2002). RAPD was an important tool to assess the variability as in Bouganvillea (Srivastava et al, 2009), Catharanthus roseus (Shaw et al, 2009), Coffea (C. arabica autogamous - Diniz et al, 2005;C.canephora allogamous -Ferrão et al, 2009), cassava (Manihot esculenta -Ferreira et al, 2008 and in Aspidosperma (rainforest allogamous tree - Torezan et al, 2005).…”

Determinação da pureza varietal em lotes de sementes de milho através de marcadores morfológicos e microssatélites.

“…número reduzido e, consequentemente, insuficiente para marcar alelos de interesse de vários genes da espécie (Ramalho et al, 1990). A observação do fenótipo muitas vezes não oferece informações a respeito dos atributos genéticos, como os relacionados à qualidade dos grãos que influem na concentração de óleo e proteína ou na resistência a estresses bióticos e abióticos incorporados aos cultivares (Menezes et al, 2002). Dessa forma, distinguir cultivares morfologicamente semelhantes, mas diferentes nessas características pode não ser possível Quando as diferenças morfológicas são facilmente visualizadas, como a distinção de sementes através da observação da cor do endosperma ou do pericarpo, a verificação da presença de sementes contaminantes é mais rápida, com possibilidade de remoção do genótipo indesejável durante o beneficiamento, como por exemplo, através do uso de equipamentos eletrônicos que separam pela cor (Wyck, 1988).…”