Verificação intralaboratorial da performance obtida em método de determinação de ocratoxina A por purificação em coluna de imunoafinidade e cromatografia líquida de alta eficiência usando café

Abstract

Micotoxinas fazem parte de um grupo de contaminantes quimicamente complexos que podem estar presentes em uma grande variedade de alimentos, como ocratoxina A no milho, trigo, café, cevada, centeio, aveia, feijão e rações para animais. Sua incidência tem sido maior em países da Europa Central e pode ser responsável por perdas econômicas significativas associadas ao seu impacto na saúde humana, produtividade animal e comércio doméstico e internacional (ANGSUBHAKOrN, 1989).A ocratoxina A, Hsieh (1988), é a micotoxina mais tóxica do grupo das sete ocratoxinas existentes. É produzida principalmente pelo Aspergillus ochraceus, Penicillium verrucosum e Aspergillus westerdijkiae, o último mais comumente verificado na produção de OTA em café, e age mais intensamente nos rins. Em dosagem aguda em aves, provoca tremores e perda de reflexos, em muitos outros animais dificulta a coagulação do sangue e diminui a defesa do organismo contra infecções.Uma vez ingerida, é rapidamente absorvida no trato gastrointestinal, passa para o sangue, liga-se à albumina e é distribuída em concentrações tecidulares decrescentes para os pulmões, fígado, rins, coração, intestino e testículos, e pode atravessar a barreira placental (LI;JI, 2003). AbstractOchratoxin A is a food contaminant which can appear in several foods and can be harmful not only to human health, but also to the economy. In order to quantify properly an analite, even when using standard methods, it is necessary to check the validation method requirements. Therefore, a single laboratory validation of the method using immunoaffinity column and high performance liquid chromatography in spiked samples of ground green coffee beans was conducted. The evolution of the measurements along the analyte was sigmoid, as expected, and the range showed botton between 0.489 and 1.59, and top between 220 and 300 µg.kg -1 , top. Linear regression was not rejected in this range and there was no external significant interference in the model. The intercept was in the origin and the linear coefficient did not differ significantly from 1.00 (p < 0.05). The standard deviations depended on the concentrations of ochratoxin A, similarly to studies in the literature, and the estimated values of the relative standard deviation obtained were in accordance with the values from those studies. Therefore, the laboratory proved competence in this measurement process, especially for green coffee beans. Keywords: food safety; range; outliers; precision; metrology. ResumoA ocratoxina A é um contaminante que pode estar presente em vários alimentos e ser prejudicial tanto para a saúde quanto para a economia, então deve ser medida. Mas, para bem quantificar um analito, mesmo com o uso de métodos oficiais, é necessário verificar o sistema de medição; nisto se empregam requisitos de validação. Assim, procedeu-se a uma verificação intralaboratorial de método por purificação em coluna de imunoafinidade e cromatografia líquida de alta eficiência em amostras de café verde artificialmente contaminadas e medidas. Foi obti...