Micropropagation and Cellular Behaviour Changes During in vitro Flowering of Impatiens balsamina

Abstract

In this study, the micropropagation of Impatiens balsamina was established from stem and shoot explants. The effects of GA 3 and glutathione on the morphogenesis of this species were also investigated, in order to induce in vitro flowering. It was found that the optimum in vitro plant regeneration was achieved on MS medium supplemented with 1.0 mg L -1 GA 3 and in vitro flowering was also obtained from the same medium after 4 weeks of culture. To understand cellular behavior during in vitro flowering, Mitotic Index (MI), chromosome counts, measurement of mean cell and nuclear areas, DNA measurements and ploidy levels were analyzed from in vivo plants, in vitro grown plants and plantlets that flowered in vitro. The chromosome count was the same for all, 2x=2n=14 or n=7. However, it was observed that in vitro flowering plants of Impatiens balsamina had the highest percentage of polyploid cells (30.7%), based on a histogram plotted by the AxioVision 4.7 software. It was found that plant growth regulators, especially GA 3 , increased the polyploidy level of the meristematic root cells. behavior and acclimatization.RESUMO -Neste estudo, a micropropagação de Impatiens balsamina foi estabelecida a partir de explantes de caule e parte aérea. Os efeitos do GA 3 e da glutationa na morfogênese dessa espécie também foram investigados, de modo a induzir o florescimento in vitro. Verificou-se que a melhor regeneração in vitro de plantas foi obtida em meio MS adicionado com 1,0 mg L -1 de GA 3 , e o florescimento in vitro também foi obtido a partir do mesmo meio após quatro semanas de cultura. Para entender o comportamento das células durante o florescimento in vitro, o Índice Mitótico (MI), a contagem de cromossomos, a medição da área média de célula e núcleo, as medições de DNA e os níveis de ploidia foram analisados a partir de plantas in vivo, plantas cultivadas in vitro e plântulas que floresceram in vitro. A contagem cromossômica foi a mesma para todos: 2x=2n=14 ou n=7. No entanto, observou-se que as plantas de Impatiens balsamina com florescimento in vitro apresentaram a maior porcentagem de células poliploides (30,7%), com base em um histograma executado pelo software AxioVision 4.7. Verificou-se que os reguladores de crescimento das plantas, especialmente o GA 3 , aumentaram o nível de poliploidia das células de raiz meristemáticas.Palavras-chave: regeneração, ácido giberélico, glutationa, resposta de florescimento, comportamento das células e aclimatação.