Triagem de suportes orgânicos e protocolos de ativação na imobilização e estabilização de lipase de Thermomyces lanuginosus

Mendes, Adriano A.; Castro, Heizir F. de; Giordano, Raquel de Lima Camargo

doi:10.1590/s0100-40422013000200008

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“…A escolha do melhor método de imobilização deve ser baseada em parâmetros como atividade do imobilizado, estabilidade operacional, custo do procedimento de imobilização, toxicidade dos reagentes e propriedades finais desejadas para a enzima imobilizada (MENDES, 2013). Diversos tipos de imobilização têm sido empregados com lipases, como adsorção hidrofóbica, adsorção iônica, encapsulação em matrizes e ligação covalente unipontual e multipontual.…”

Section: Introductionunclassified

ESTUDO DAS CONDIÇÕES DE IMOBILIZAÇÃO DA LIPASE DE Thermomyces lanuginosus PARA A PRODUÇÃO DE BIODIESEL

Bordinhão¹,

Matte²,

Poppe³

et al. 2015

Anais Do Congresso Brasileiro De Engenharia Química Em Iniciação Científica - Cobeq IC 2015

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RESUMO -O biodiesel é uma mistura de ésteres alquílicos de ácidos graxos que podem ser obtidos a partir da reação de transesterificação dos triglicerídeos de origem animal ou vegetal com álcoois, sendo uma alternativa substituição do convencional diesel de petróleo. A sua produção pode ser realizada pela catálise enzimática, processo que se torna ainda mais vantajoso quando se utiliza a lipase imobilizada. Neste trabalho, testamos diversos tipos de imobilização de lipases em esferas de quitosana, a fim de avaliar a estabilidade da enzima. Foram realizados testes com imobilização uni e multipontual, utilizando ativação com glicidol e com glutaraldeido. A eficiência foi analisada em virtude do rendimento de reações de produção de biodiesel, utilizando etanol e óleo de soja, e também da estabilidade frente a diversos usos. Assim, foi possível a produção de um derivado enzimático capaz de alcançar 47% de rendimento na síntese de biodiesel, sendo estável após 10 usos mantendo sua atividade inicial. INTRODUÇÃOO biodiesel é uma mistura de mono-alquil ésteres de ácidos graxos obtidos a partir da transesterificação dos triglicerídeos de origem animal ou vegetal com álcoois de cadeia curta, sendo uma alternativa da substituição do convencional diesel de petróleo. (DERMIBAS, 2008). Sua obtenção poder ser realizada via catálise química ou via catálise enzimática.São diversas as vantagens de se empregar lipases como catalisadores, tais como a possibilidade de utilização de condições suaves de reação evitando a formação de subprodutos, além da possibilidade de maior controle e eficiência do processo (GARCIA et al, 2000). Lipases (triacilglicerol éster hidrolases, EC 3.1.1.3) são produzidas por microorganismos (fungos e bactérias), animais e plantas. As enzimas comerciais são derivadas principalmente de fontes microbianas devido aos baixos custos de produção e da facilidade de manipulação de suas propriedades (ANTCZAK, 2009). As lipases podem ser classificadas segundo a sua especificidade em relação à molécula ácida ou alcoólica do substrato. A lipase de Thermomyces lanuginosus, utilizada neste trabalho, é uma lipase 1,3 específica, liberando os ácidos graxos das posições 1 e 3 (CASTRO, 2004).A imobilização de enzimas em um suporte sólido é uma tecnologia importante para a estabilização e melhoramento da atividade da enzima, sendo este processo dependente das interações químicas que ocorrem entre o suporte e as moléculas da enzima (POPPE, 2013).

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Section: Introductionunclassified

ESTUDO DAS CONDIÇÕES DE IMOBILIZAÇÃO DA LIPASE DE Thermomyces lanuginosus PARA A PRODUÇÃO DE BIODIESEL

Bordinhão¹,

Matte²,

Poppe³

et al. 2015

Anais Do Congresso Brasileiro De Engenharia Química Em Iniciação Científica - Cobeq IC 2015

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“…Para que a sua utilização seja economicamente viável e eficiente, as enzimas devem ser melhoradas antes da sua utilização em processos industriais, por exemplo, pela técnica de imobilização. Assim, as lipases imobilizadas podem ser recuperadas após as reações, reutilizadas mais que uma vez, possuir facilidade na remoção da mistura reacional e ser adaptável em vários desenhos de reatores, estes processos, inviáveis quando esta se encontra na forma livre (Torres et al, 2011;Mendes et al, 2013).…”

Section: Introductionunclassified

“…Essas condições podem ser moldadas para modificar as propriedades da enzima imobilizada para uso em determinada reação (Idris e Bukhari, 2012). Existem vários métodos para imobilização de lipases, incluindo adsorção, ligação covalente, aprisionamento, encapsulamento e ligaçao cruzada (Dalla-Vecchia et al, 2004;Mendes et al, 2011aMendes et al, e 2011bTorres et al, 2011;Mendes et al, 2013).…”

Section: Introductionunclassified

EFEITO DA ESTABILIDADE DE ESTOCAGEM DA LIPASE COMERCIAL DE Candida antarctica B (CALB) NA FORMA LIVRE E IMOBILIZADA POR CONFINAMENTO EM SUPORTE DE POLIURETANO

Fernandes¹,

Nyari²,

Ficanha³

et al. 2015

Anais Do XX Congresso Brasileiro De Engenharia Química

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RESUMO -A imobilização de enzimas em suportes apropriados se constitui em uma área de interesse quanto à melhoria de processos e redução de custos. Sendo assim, o suporte ideal deve adsorver irreversivelmente a enzima, sem interferir na reação enzimática ou afetar sua atividade. Neste contexto, objetivo desse estudo foi avaliar a estabilidade de estocagem em temperaturas ambiente (10 -25 °C) e refrigerador (2 -8 °C) da enzima lipase Candida antarctica B (CAL B) na forma livre e imobilizada por confinamento em suporte de poliuretano (PU). A estabilidade da CAL B livre apresentou no decorrer de 40 dias de estocagem a temperatura ambiente, atividade residual de 52 % e em refrigerador, 34 %. Em contrapartida, o imobilizado em poliuretano mostrou-se em 375 dias de exposição atividades residuais de 87 % e 51 % respectivamente nas mesmas condições. Os resultados mostram que esse biocatalisador imobilizado rendeu um derivado ativo e estável que pode ser aplicado em síntese de ésteres em reatores de leito fixo.

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“…[12][13][14] Nosso grupo de pesquisa desenvolveu formulações na forma de filmes, utilizando a quitosana como…”

unclassified

“…11 É um polímero atóxico, biocompatível e biodegradável, características desejáveis e necessárias para veiculação de fármacos, sendo utilizada em diversas formulações farmacêuticas como pós, comprimidos, emulsões e géis, além de ser utilizado em imobilizações enzimáticas. [12][13][14] Nosso grupo de pesquisa desenvolveu formulações na forma de filmes, utilizando a quitosana como…”

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Desenvolvimento e validação de método analítico espectrofotométrico para quantificação de nerolidol em um dispositivo polimérico de liberação prolongada, após derivatização com vanilina

et al. 2014

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dos fármacos disponíveis no arsenal terapêutico para o tratamento dessa doença estimulam o desenvolvimento de novas formas de administração de medicamentos que facilitem a adesão ao tratamento dessa doença, bem como promovam uma menor toxicidade dos mesmos. A volatilidade e a baixa hidrossolubilidade dessa substância estimulam o desenvolvimento de sistemas de liberação modificada deste ativo na forma de sistemas matriciais poliméricos.Um polímero bastante utilizado na literatura científica para veiculação de fármacos é a quitosana. 10Esta substância é a forma desacetilada da quitina, que é o segundo polímero mais abundante na natureza, por isso é uma fonte renovável e de baixo custo, tendo grande importância econômica e ambiental.11 É um polímero atóxico, biocompatível e biodegradável, características desejáveis e necessárias para veiculação de fármacos, sendo utilizada em diversas formulações farmacêuticas como pós, comprimidos, emulsões e géis, além de ser utilizado em imobilizações enzimáticas. [12][13][14] Nosso grupo de pesquisa desenvolveu formulações na forma de filmes, utilizando a quitosana como INTRODUÇÃOO nerolidol é um sesquisterpeno acíclico (Figura 1) de origem natural encontrado em muitos óleos voláteis de plantas como Cymbopogon citratus (DC) Stapf. (capim-limão), Lavandula officinalis Chaix (alfazema) e Jasminum sp. (jasmim).1 É um óleo amarelo claro com aroma de flores com reminiscências de rosa e maçã. É utilizado em perfumes, xampus, sabonetes e outros produtos de higiene pessoal, bem como em produtos não cosméticos de limpeza, com um consumo mundial de 10-100 toneladas/ano.2 O nerolidol possui atividade antiúlcera, antimicromiana, anticancerígena e tem atividade biocida para diferentes patógenos, inclusive protozoários.3-7. Além disso, é utilizado como agente promotor de absorção de fármacos na pele, como por exemplo anti-inflamatórios como os cortiscoteróides e o dicofenaco de sódio e de anti-hipertensivos como o hidrocloridrato de verapamil. 8A utilização do nerolidol como fármaco no tratamento da leishmaniose foi recentemente estudada.9 A dificuldade relacionada a toxicidade da maioriaThis work describes the development and validation of analytical method to assay nerolidol in a hydrophilic matrix of quitosan by UV/visible spectroscopy. The method is based on the formation of purple derivative between nerolidol and vanillin. The validated method was linear (2.5 -50 mg mL -1 , concentration range, r > 0.99), precise (RSD 0.44% for repeatability and 0.32% for intermediate precision), accurate (100.04% recovery), robust and specific. Detection and quantitation limits were 0.74 mg mL -1 and 2.26 mg mL -1 , respectively. The method is simple and fast and it was applied successfully. Alternatively, the described method may be applied for the analysis of alcohols and unsaturated lipids.

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Triagem de suportes orgânicos e protocolos de ativação na imobilização e estabilização de lipase de Thermomyces lanuginosus

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ESTUDO DAS CONDIÇÕES DE IMOBILIZAÇÃO DA LIPASE DE Thermomyces lanuginosus PARA A PRODUÇÃO DE BIODIESEL

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EFEITO DA ESTABILIDADE DE ESTOCAGEM DA LIPASE COMERCIAL DE Candida antarctica B (CALB) NA FORMA LIVRE E IMOBILIZADA POR CONFINAMENTO EM SUPORTE DE POLIURETANO

Desenvolvimento e validação de método analítico espectrofotométrico para quantificação de nerolidol em um dispositivo polimérico de liberação prolongada, após derivatização com vanilina

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