Mecanismos de Separação em Eletroforese Capilar

Abstract

Recebido em 6/11/96; aceito em 14/4/97 SEPARATION MECHANISMS IN CAPILLARY ELECTROPHORESIS. Since its inception in the 80's, capillary electrophoresis has matured into a well established technique for the separation and analysis of complex samples. One of its strongest aspects is the ability to handle materials from a diversity of chemical classes, ranging from few to millions of Daltons. This is only possible because several modes of electrophoresis can be performed in a single capillary format. In this work, relevant aspects of capillary zone electrophoresis in its three modes (free solution, micellar and gel), capillary isoelectric focusing and capillary isotachophoresis are discussed and many representative applications are presented.Keywords: free solution capillary electrophoresis; micellar electrokinetic capillary chromatography; capillary electrochromatography; capillary gel electrophoresis; capillary isoelectric focusing; capillary isotachophoresis. REVISÃO INTRODUÇÃOA ciência das separações, em termos de instrumentação analítica, contemplou nas últimas décadas grandes avanços tecnológicos: a década de 50 foi caracterizada pela introdução da cromatografia em fase gasosa (GC), enquanto que a década de 70 testemunhou o desenvolvimento da cromatografia em fase líquida (HPLC). Os anos 80, mais precisamente os últi-mos dez anos, foram marcados pela implementação da terceira grande técnica instrumental de separação, a eletroforese capilar [1][2][3][4][5][6][7][8] . O rápido avanço da eletroforese capilar decorre, em parte, da simplicidade instrumental, mas principalmente da variedade dos modos de separação que podem ser efetuados em uma única coluna capilar 9 e da diversidade dos compostos passíveis de análise em cada modo 10 . Na eletroforese capilar, a separação é conduzida em tubos com dimensões de 15 a 100 µm de diâmetro interno, e 50 a 100 cm de comprimento, preenchidos com um eletrólito condutor, e submetidos à ação de um campo elétrico. O uso do capilar oferece muitas vantagens sobre os outros meios utilizados para eletroforese (placas de gel, papel, etc). Devido a fatores geométricos (a relação entre a área superficial interna e volume é apreciavelmente grande), um capilar possibilita a dissipação eficiente do calor, gerado pela passagem da corrente elétrica (efeito Joule). Além disto, a alta resistência elétrica do capilar permite o estabelecimento de campos elétricos elevados (100 a 500 V/cm), resultando em separações de alta eficiência (geralmente excede 10 5 pratos teóricos), resolução inigualável e tempos de análise apreciavelmente curtos. Outras vantagens da eletroforese capilar são: pequena demanda de amostra, com volumes tipicamente da ordem de 1 a 10 nL, e a possibilidade de injeção e detecção em fluxo.Além da migração eletroforética dos íons, outro fenômeno de migração ocorre, a eletroosmose, ou seja, fluxo de solução induzido pelo campo elétrico, o qual confere à técnica parte de suas características de alta eficiência 11 . Dentro do tubo capilar, o fluxo eletroosmótico é caracterizado por u...

Construção de câmara de luz ultravioleta para fotopolimerização de fases estacionárias monolíticas

“…A câmara foi utilizada na preparação de fases estacionárias monolíticas (FEM) no interior de capilares de sílica fundida recobertos com poliacrilato para aplicação em eletrocromatografia capilar (CEC). [4][5][6] parte eXperimental materiais 0,70 m 2 de madeira medium density fiberboard (MDF) de 15 mm de espessura; 0,25 m 2 de prancheta MDF de 3 mm de espessura; 0,45 m 2 de espelhos de 2 mm de espessura; 6 lâmpadas fluorescentes negras (UV) de 15 W, Starlux, F15-T8; temporizador eletrônico Masterclear TS-EB1 (timer digital) com período mínimo de 1 min de operação; 3 reatores (cada um com suporte para 2 lâmpadas fluorescentes); micro switch, fusível de 1,5 A e porta fusível; parafusos para madeira, arruelas, porcas, alças, dobradiças, suportes (pés) de borracha; cola para madeira, adesivo instantâneo, lixas e verniz; soquetes, conectores elétricos e abraçadeiras para as lâmpadas, cabo para alimentação elétrica e tomada.…”

Improved separation of IA and IIA metal cations in matrices with high sodium concentration by capillary electrophoresis with contactless conductometric detection

“…1 Capillary electrophoresis (CE) is a separation technique based on differences of mobility of charged species and has been applied for determination of several kinds of analytes, from small ionic species to macromolecules. 2,3 Metal cations from groups IA and IIA have been mainly analyzed by free solution capillary electrophoresis (FSCE) with indirect UV-visible absorption detection. [4][5][6][7] Although these cations can be readily separated at low concentrations (typically 10 -6 mol L -1 ), separations of concentrated samples require the use of complexating agents to selectively modify the ion mobility and improve resolution.…”

Detecção eletroquímica em eletroforese capilar

“…Hoje, a CE está bem estabelecida como técni-ca analítica e, devido aos mecanismos de separação completamente distintos da cromatografia líquida de alta eficiência, figura em muitos casos como técnica complementar a esta última. Detalhes sobre os mecanismos de separação e características da CE foram revisados em língua portuguesa por Tavares 1,2 . Resumidamente, a CE apresenta como características a alta eficiência de separação (tipicamente acima de 10 5 pratos teóricos), baixo consumo de amostras (nL) e reagentes (mL), tempos de análise reduzidos e alto grau de automação.…”