In vitro organogenesis of rangpur lime

Abstract

-Rangpur lime (Citrus limonia Osbeck) in vitro organogenesis was studied based on explant type and cytokinin culture media supplementation. Four explants types collected from epicotyl or hypocotyl regions of in vitro germinated seedlings were evaluated. The epicotyl-derived explants consisted of epicotyl segments and the hypocotyl-derived explants consisted of the entire hypocotyl segment, the hypocotyl segment attached to a cotyledon fragment, and the hypocotyl segment divided longitudinally. The explants were cultured on EME culture medium supplemented with benzylaminopurine (0, 0.5, 1.0, or 1.5 mg L -1 ). The evaluation was performed after 6 weeks. Best results considering both the explant responsiveness and number of shoots developed per explants were obtained when epicotyl segments-derived explants were evaluated. Considering the explant responsiveness of hypocotyl segments-derived explants no difference was detected between the entire hypocotyl segment and the hypocotyl segment attached to a cotyledon fragment. Moreover, the percentage of responsive explants decreased when hypocotyl segments divided longitudinally were tested. No difference was detected for the number of shoots developed per explant considering the three types of hypocotyl-derived explants. Culture media supplementation with BAP was not essential for Rangpur lime in vitro organogenesis. However, adventitious shoot development was stimulated in concentrations between 0.5 -1.0 mg L -1 . Index terms: adventitious shoot; Citrus limonia; tissue culture. ORGANOGÊNESE IN VITRO DE LIMÃO CRAVORESUMO -A organogênese in vitro de limão Cravo (Citrus limonia Osbeck) foi estudada em função do tipo de explante e da suplementação do meio de cultura com citocinina. Foram avaliados quatro tipos de explantes coletados da região do epicótilo e do hipocótilo de plântulas germinadas in vitro. Os explantes consistiram em segmentos de epicótilo, segmentos de hipocótilo, segmentos de hipocótilo ligado a um fragmento do cotilédone e segmentos de hipocótilo cortado longitudinalmente. Os explantes foram cultivados em meio de cultura EME suplementado com benzilaminopurina (0; 0,5; 1,0 e 1,5 mg L -1 ). As avaliações foram realizadas após seis semanas de incubação, e os melhores resultados considerando-se tanto a porcentagem de explantes responsivos como o número de gemas desenvolvidas por explante foram obtidos com o uso de segmentos de epicótilo como explante. Considerando os explantes derivados da região do hipocótilo, não foi detectada diferença na porcentagem de explantes responsivos com o uso de segmentos de hipocótilo ou de segmentos de hipocótilo ligado a um fragmento do cotilédone. A porcentagem de explantes responsivos diminuiu com o uso de segmentos de hipocótilo cortado longitudinalmente como explante. Não foi detectada nenhuma diferença no número de gemas adventícias desenvolvidas por explante considerando-se os três tipos de explantes derivados da região do hipocótilo. A suplementação do meio de cultura com BAP não é essencial para a organogênese ...

In vitro organogenesis and genetic transformation of mandarin cultivars

“…In this study, the adventitious shoot development occurred more frequently from epicotyl-derived explants, with more than 50% of responsive explants and more than four shoots developed per responsive explant ( Table 1), regardless of the cultivar. Similar results have been reported for Volkamer lemon, sour orange, and Rangpur lime species, showing a higher number of responsive explants when epicotylderived explants were used, comparing with internodal or hypocotyl-derived explants (TAVANO et al, 2009;SORIANO et al, 2012).…”

“…In vitro citrus organogenesis is usually induced from juvenile tissue, including epicotyl-derived segments extracted from in vitro germinated seedlings (GARCIA-LUIS et al, 2006;SORIANO et al, 2012) or internodalderived segments extracted from juvenile plants cultivated under greenhouse conditions (TAVANO et al, 2009;MARQUES et al, 2011). In most of citrus tissue culture protocols, the development of adventitious shoots occurred in culture media supplemented with growth regulators (SILVA et al, 2005;OLIVEIRA et al, 2010;BASSAN et al, 2011).…”

Transformação genética de Citrus sinensis (L.) Osbeck para resistência a Candidatus Liberibacter ssp

“…Para a realização de experimentos de transformação genética é necessário primeiramente o estabelecimento de protocolos eficientes de regeneração de plantas in vitro (SINGH; RAJAM, 2009). Diversos estudos têm sido realizados visando estabelecer as melhores condições para a regeneração via organogênese in vitro em diferentes espécies de citros, principalmente as mais recalcitrantes (TAVANO et al, 2009;SORIANO et al, 2012). Para a obtenção de plantas transgênicas é necessário que as células competentes para a regeneração e transformação genética tenham a mesma origem e também que seja possível produzir plantas a partir das gemas adventícias desenvolvidas.…”