Identificação e caracterização de genes vip e cry coleóptero‑específicos em isolados de Bacillus thuringiensis

Abstract

O objetivo deste trabalho foi identificar e caracterizar os genes cry3, vip1, vip2 e vip1/vip2 em uma coleção de 1.078 isolados de Bacillus thuringiensis potencialmente tóxicos para larvas de coleópteros. Foram utilizados pares de oligonucleotídeos iniciadores gerais obtidos a partir de regiões conservadas dos genes e do alinhamento de sequências consenso. Posteriormente, os isolados positivos foram caracterizados por meio da técnica de PCR‑RFLP, tendo-se utilizado enzimas de restrição específicas, para identificar novas subclasses de genes nos isolados. Cento e cinquenta e um isolados foram positivos para os genes avaliados, com maior frequência para o gene vip1/vip2 (139 isolados). Pela técnica de PCR‑RFLP, foram observados 14 perfis polimórficos, o que indica a presença de diferentes alelos e, consequentemente, de distintas subclasses desses genes.

Synergism and Antagonism between Bacillus thuringiensis Vip3A and Cry1 Proteins in Heliothis virescens, Diatraea saccharalis and Spodoptera frugiperda

“…They are classified into four groups ( http://www.lifesci.sussex.ac.uk/home/Neil_Crickmore/Bt/vip.html ). Vip1 and Vip2 act as a binary protein with activity against coleopteran larvae [3] – [4] , Vip3 proteins are active against a large number of economically important lepidopteran pests [5] – [6] and, so far, very little is known about Vip4 proteins. Some studies have shown that the transcription of several cry genes in B. thuringiensis occurs before the onset of sporulation [7] and, therefore, at least some Cry and Vip toxins may be expressed together and interact within the insect gut.…”