Ensaio cinético para reações de fixação de complemento no sistema moléstia de Chagas

Abstract

U m ensaio para a avaliação da reatividade de antígenos de Trypanosoma cruzi, baseado na medida do com plem ento livre pelo tem po necessário à hemólise d e 50% pôde ser aplicado na determ i nação da dose d e m áxim a reatividade de antígenos, em reações com o sôro chagásico de referência.Quando se avalia, p o r m étodo cinético, as quantidades de com plem ento livre, em reações incubadas, p o r vários períodos de tem po e se projetam em logaritm os os tempos necessários para 50% de h e m ó lise, contra os tempos de incubação, determinam -se pontos sobre um a reta, cujos parâmetros caracterizam a capacidade fixado ra do com plem ento, dos com plexos imunes.O m étodo cinético se recomenda pela sua precisão, fácil execução e rapidez, na comparação de antígenos, em reações de fixação do com plem ento. INTRODUÇÃOA fixação de complemento pelo complexo antígeno-anticorpo pode ser apreciada pela medida do complemento livre durante o perío do de incubação, desde que se conheça a quan tidade de complemento inicialmente presente. A medida do complemento livre é feita pelo tempo necessário para 50% de hemólise de um volume estipulado de hemácias sensibiliza das (1,5).Dessa forma, o ensaio de antígenos de T. cruzi, pode ser feita em reações com um sôro de referência para moléstia de Chagas, baseado nas seguintes premissas: 1? Reações de fixação de complemento feitas nas mesmas condições, e com os mes mos terão deixado livre a mesma quantidade de complemento que levará o mesmo tempo para hemólise de 50%.2? Quando as reações são feitas, nas mes mas condições, mas com antígenos que dife rem quali ou quantitativamente, as suas veloci dade de hemólises são diferentes.

Determinação cinética de atividade anticomplementar

“…A hemólise é considerada como exemplo de reação de alternação e a equação de Mentz von Krogh ê perfeitamente tãvel ãs relações entre hemólise e complemento. Expressões das da equação de von Krogh são aplicáveis, da mesma maneira,ã ciné tica de hemólise pelo complemento(Almeida, 1949 e 1950; heparina, quer o tratamento logístico quer sua expressão não lo garítmica são satisfatórios para retificação das curvas e cálculo va, sigmoide no caso, obtida da medida da atividade anticomplementar, que é a aplicação da fórmula de probitos aos percentuais inibição e logaritmos ãs quantidades de heparina. Embora os autores tenham utilizado método estático de fixação de complemento a trans posição desta solução aos nossos resultados não constituiu proble ma.…”