Quantitative toxoplasma gondii oocyst detection by a modified Kato Katz test using Kinyoun staining (KKK) in ME49 strain experimentally infected cats

Abstract

SUMMARYWe detected Toxoplasma gondii oocysts in feces of experimentally infected cats, using a Kato Katz approach with subsequent Kinyoun staining. Animals serologically negative to T. gondii were infected orally with 5x10 2 mice brain cysts of ME49 strain. Feces were collected daily from the 3 rd to the 30 th day after challenge. Oocysts were detected by qualitative sugar flotation and the quantitative modified Kato Katz stained by Kinyoun (KKK). In the experimentally infected cats, oocysts were detected from the 7 th to 15 th day through sugar flotation technique, but oocysts were found in KKK from the 6 th to 16 th day, being sensitive for a larger period, with permanent documentation. The peak of oocysts excretion occurred between the 8 th to 11 th days after challenge, before any serological positive result. KKK could be used in the screening and quantification of oocysts excretion in feces of suspected animals, with reduced handling of infective material, decreasing the possibility of environmental and operator contamination.

Mini-FLOTAC for counting Toxoplasma gondii oocysts from cat feces – Comparison with cell counting plates

“…Many methods have been used to detect T. gondii oocysts in feces, environmental samples (soil, water), and fruits and vegetables (Aramini et al, 1999;Dumetre and Darde, 2003;Herrmann et al, 2011;Lalonde and Gajadhar, 2011;Meireles et al, 2008;Salant et al, 2010;Sullivan and Jeffers, 2012;Villena et al, 2004). Recent studies use PCR for the detection of oocysts (Lalonde and Gajadhar, 2011), while others use cell counter plates such as Kova Slide (Lelu et al, 2011) or Kato Katz (Meireles et al, 2008).…”

“…Recent studies use PCR for the detection of oocysts (Lalonde and Gajadhar, 2011), while others use cell counter plates such as Kova Slide (Lelu et al, 2011) or Kato Katz (Meireles et al, 2008). Although these techniques are reliable, they either lack sensitivity/accuracy/precision or their cost effectiveness is not justified, and if not disposable, materials cannot be washed because of the water contamination.…”

Avaliação da imunidade e proteção induzida em modelos experimentais por extrato solúvel de taquizoítos de Toxoplasma gondii irradiado por 60CO.

“…Para a doença, a proteção implica na produção de linfócitos CD8 específicos, como relatado em diversos modelos experimentais (Mendes et al, 2011). Para prevenir a invasão são necessários anticorpos e proteção de mucosas, tanto para produção de oocistos (Meireles et al, 2008) quanto para prevenção da infecção (Zorgi et al, 2011). A produção e a qualidade dos anticorpos estão diretamente relacionados ao estabelecimento de células B de memória (Bergmann et al, 2013), e nossos dados também mostraram que nossa imunização é muito mais eficiente na criação destas células.…”

Toxoplasma gondii vs radiação ionizante: imunidade humoral e celular em baço e intestino de camundongos isogênicos imunizados com taquizoítos irradiados por Cobalto 60

“…O protozoário invade as células do intestino delgado dos felinos onde ocorre o ciclo enteroepitelial, caracterizado por reprodução sexuada do parasita, liberando oocistos nas fezes (FRENKEL et al, 1970). O felino infectado pode excretar milhões de oocistos por dia, nas fezes, por até 10 dias de excreção (MEIRELES et al, 2008).…”

“…O protozoário invade as células do intestino delgado dos felinos onde ocorre o ciclo enteroepitelial, caracterizado por reprodução sexuada do parasita, liberando oocistos nas fezes (FRENKEL et al, 1970). O felino infectado pode excretar milhões de oocistos por dia, nas fezes, por até 10 dias de excreção (MEIRELES et al, 2008 Alguns taquizoítos, após a invasão da célula hospedeira desenvolvem-se mais lentamente transformando-se em bradizoítos, que preferencialmente vão formar cistos em células mais estáveis como no tecido cerebral, músculo esquelético e cardíaco (DUBEY et al, 1998a …”