Analysis of the genetic polymorphism of Paracoccidioides brasiliensis and Paracoccidioides cerebriformis "Moore" by random amplified polymorphic DNA (RAPD) and 28S ribosomal DNA sequencing: Paracoccidioides cerebriformis revisited

Abstract

SUMMARYOur purpose was to compare the genetic polymorphism of six samples of P. brasiliensis (113, 339, BAT, T1F1, T3B6, T5LN1), with four samples of P. cerebriformis (735, 741, 750, 361) from the Mycological Laboratory of the Instituto de Medicina Tropical de São Paulo, using Random Amplified Polymorphic DNA Analysis (RAPD). RAPD profiles clearly segregated P. brasiliensis and P. cerebriformis isolates. However, the variation on band patterns among P. cerebriformis isolates was high. Sequencing of the 28S rDNA gene showed nucleotide conservancy among P. cerebriformis isolates, providing basis for taxonomical grouping, and disclosing high divergence to P. brasiliensis supporting that they are in fact two distinct species. Moreover, DNA sequence suggests that P. cerebriformis belongs in fact to the Aspergillus genus.

Aplicação de metodologias de preservação e caracterização de fungos na coleção de culturas do Instituto de Medicina Tropical de São Paulo

“…Processos de liofilização, criopreservação ou manutenção em água esterilizada são os mais adequados para a preservação, pois se baseiam na redução do metabolismo celular a um nível basal, mantendo as características fenotípicas e genotípicas dos micro-organismos, além de minimizar os riscos de contaminação (Castellani, 1967;Butterfield et al, 1974;McGinnis et al, 1974;Boesewinkel, 1976;Lastra et al, 2001;Baker e Jefries, 2006). No entanto, não existe um método universal que seja eficiente na preservação de todos os gêneros e espécies de fungos, devido às diferenças existentes em suas características fisiológicas e metabólicas (Figueiredo, 2001;Deshmukh, 2003;Paoli, 2005 (Silva et al, 1994;Cavalcanti et al, 2005;Neufeld e Oliveira, 2008).…”

“…Um aspecto relevante do estudo foi a observação da perda da capacidade de reversão de fase (dimorfismo térmico) de diversos isolados de P. brasiliensis, S. schenckii e B. dermatitidis, provavelmente devido à manutenção das culturas sob repiques sucessivos; este fato já havia sido descrito em estudos anteriores realizados na micoteca, pela avaliação de sete isolados de P. brasiliensis, com apenas três revertendo para a fase leveduriforme (Cavalcanti et al, 2005). anos, verificando que mesmo após a passagem em animal, este processo não pode ser revertido (Lima et al, 2004 (Nakasone et al, 2004).…”