Imunofluorescência realizada em cérebros de camundongos infectados com vírus rábico - cepa CVS, em diferentes estágios de decomposição

Abstract

O teste de imunofluorescência (IF) foi avaliado na detecção de vírus rábico presente em cérebros de carcaças de camundongos infectados com vírus da cepa CVS, os quais foram conseguidos através de uma combinação de tratamentos, em que se variaram as temperaturas (4,25 e -20ºC) e o tempo de armazenamento. No teste de IF realizado com impressões cerebrais de carcaças que haviam sido submetidas à temperatura de 25ºC por 12 -18 h, houve maior dificuldade de visualização imediata dos corpúsculos de inclusão, enquanto que nos materiais conservados a 4ºC por até 48 h, as inclusões foram facilmente reconhecidas. Carcaças mantidas a -20ºC mantiveram-se viáveis à identificação pela IF mesmo após terem sido armazenadas por 720 h quando foram feitas as últimas observações. Em carcaças mantidas a 25ºC por 10 h, com tratamento posterior a 4 e -20ºC, o antígeno rábico não pode ser identificado através da IF, em conseqüência da decomposição das carcaças que ocorrem, respectivamente, após 10 e 24 h. Recomenda-se, portanto, empregar o teste de IF, em caráter de rotina, no controle de qualidade da vacina contra a Raiva, no que diz respeito a prova de vírus residual (teste de verificação da inativação viral), de vez que ele permite esclarecer mortes assintomáticas ocorridas em animais inoculados com a vacina, durante o período de observação da prova (21 dias), bem como evitar a sua repetição quando essas mortes ocorrem, o que representa considerável economia de tempo.

Influence of canine brain decomposition on laboratory diagnosis of rabies

“…Valentini et al 10 and Vasconcellos et al 11 , using mice brains, reported that the fluorescence of rabies antigens could still be identified in materials showing advanced stage of putrefaction. The findings of the specific fluorescence in these materials varied according to the state of decomposition.…”

Detection of Rabies Virus RNA Isolated from Several Species of Animals in Brazil by RT-PCR.

“…The sensitivity and specificity of FAT have been compared with those of histologic examination and the mouse inoculation test (MIT) [22]. As problematics in tropical countries such as Brazil, degradation of the sample dramatically compromises the sensitivity of FAT [23]. Compared with FAT and MIT, the reverse transcription and polymerase chain reaction (RT-PCR) to identify the RNA of rabies virus is more accurate for the diagnosis of samples partially degraded by heat [5,12,14,[17][18][19]25], although the use of this technique for routine diagnosis is still controversial [26].…”