As infecções do trato urinário (ITU) correspondem às infecções da uretra (uretrite), bexiga (cistite) e rins (pielonefrite), são causadas por uma variedade de microrganismos, sobretudo bactérias Gram-negativas, e têm significância clínica e epidemiológica importantes. Esse trabalho teve como objetivo realizar uma revisão bibliográfica sobre essas infecções, com enfoque nos fatores de virulência aos quais os organismos lançam mão para obterem êxito no processo de colonização e infecção, e no diagnóstico e identificação laboratorial desse grupo de doenças. Realizou-se uma busca, na base PubMed, de estudos envolvendo os fatores de viruência e o diagnóstico das ITUs. A pesquisa mostrou que os principais fatores de virulência são pilli, exopolissacarídeos, flagelos, biofilme, filamentação, produção de toxinas como fator necrosante citotóxico, hemolisina, aglutinina tóxica, urease, proteases, α-hemolisina e sideróforos. Esses fatores contribuem para a migração dos microrganismos do local de entrada para a uretra, bexiga e rins. Também auxiliam a enganar o sistema imunológico do hospedeiro, obter alimento e sobreviver por mais tempo nos tecidos infectados. O diagnóstico das ITUs, apesar dos sintomais clínicos (dor ao urinar, aumento na frequência urinária, dor suprapúbica, hematúria, febre, dor no flanco e sensibilidade no ângulo costovertebral) muitas vezes presentes no hospedeiro, é confirmado através de crescimento bacteriano em cultura de amostra de urina, em contagem superior a 100.000 UFC/mL para amostras de jato médio e superior a 10.000 UFC/mL para amostras cateterizadas.Palavras-chave: infecções do trato urinário; bacteriúria; pielonefrite; diagnóstico; fatores de virulência.