Transformação genética da batata cultivar Achat via Agrobacterium tumefaciens

Ferreira, Adriana Teixeira; Romano, Eduardo; Cattony, Monica K.; Nascimento, Adriana S.

doi:10.1590/s0102-05362000000100009

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“…Atlantic, wherein, from combination of zeatin, IAA (3-indol-acetic acid) and NAA, regeneration protocols were established for in vitro cultivation. Torres et al, 2000, whom studied cv. Achat, achieved success in regeneration using basic MS medium supplemented with zeatin at a 5.00 mg L -1 concentration and rooting using 0.05 mg L -1 of NAA.…”

Section: Plant Regenerationmentioning

confidence: 99%

“…New knowledge acquired after complete potato genome sequencing (TPGSC, 2011) opened a range of possibilities to genetic manipulation, specially through genetic transformation due to the high potato susceptibility to Agrobacterium tumefaciens infection (Vayda and Belknap, 1992). Recombinant DNA technology and plant regeneration from tissue culture have been successfully employed to introduce exogenous genes into an agricultural plant of interest, besides allowing better understanding regarding the role of different genes and metabolic pathways (Vayda and Belknap, 1992;Torres et al, 2000;Romano et al, 2001;Homrich et al, 2012). Regeneration of feasible plantlets is a limiting step of genetic transformation protocols and most of the tissue culture process is highly genotype dependent.…”

Section: Introductionmentioning

confidence: 99%

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A direct organogenesis protocol from shoot segments of Solanum tuberosum cv. Monalisa

Campos¹,

Silva²,

Fabiana³

et al. 2016

Aust J Crop Sci

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Transgenic technology is an excellent alternative for improvement of crop production and disease free crops such as potato, which is one of the most important crops worldwide. One of the first steps to apply the transgenic technique is the establishment of an efficient plant regeneration protocol. This is a limiting step in this kind of study, since most protocols are species-specific and some of them do not adequately respond to in vitro culture or present low regeneration rates. The objective of this study was to stablish an efficient regeneration protocol of Solanum tuberosum cv. Monalisa from internodes explants. This work is important since most in vitro protocols are based on shoots. Twenty five treatments were performed, with each treatment being composed of six internodes in flasks containing MS medium supplemented with a fixed concentration of zeatin riboside (3 mg.L-1) (ZEA), varying concentrations of naphthaleneacetic acid (0 to 1 mg. L-1) (NAA), and gibberellic acid (0 to 3 mg.L-1) (GA 3). The treatment composed of ZEA, 0.05 mg.L-1 of NAA, and 0.10 mg.L-1 of GA 3 was considered the best for shoot regeneration from potato internodes. The study was able to establish a specific regeneration protocol for Monalisa cultivar. This result can be very useful since it is possible to obtain plants from internode, without the requirement of meristematic regions, enabling the obtainment of a higher number of plants.

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Section: Plant Regenerationmentioning

confidence: 99%

Section: Introductionmentioning

confidence: 99%

A direct organogenesis protocol from shoot segments of Solanum tuberosum cv. Monalisa

Campos¹,

Silva²,

Fabiana³

et al. 2016

Aust J Crop Sci

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“…A utilização de AIA combinado com ZEA, promoveu a inibição da brotação para ambos tipos de explantes. Torres et al (2000), verificaram que na regeneração de plantas de batata cultivares Baronesa e Macaca, entrenós se mostraram mais eficentes que explantes foliares. Campos (1995) trabalhando com batata cv.…”

Section: Resultsunclassified

Organogênese in vitro de batata (Solanum tuberosum L.) cultivar Atlantic visando transformação genética

et al. 2013

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A obtenção de cultivares comerciais de batata com resistência a fitopatógenos é uma alternativa muito promissora que a engenharia genética pode proporcionar, através da introdução de genes exógenos visando transformação genética. Para tal, torna-se imprescindível estabelecer um sistema eficiente de transformação, e neste sentido a determinação de um protocolo de organogênese in vitro é o passo fundamental para este processo. Objetivou-se determinar um protocolo eficiente para a transformação genética de batata cv. Atlantic. A eficiência da organogênese in vitro é influenciada pelo tipo de explante e pelo tipo e concentrações de reguladores de crescimento utilizados. Segmentos internodais de batata cv. Atlantic apresentam melhor capacidade organogenética que explantes foliares. Recomenda-se utilizar o meio woody plant medium (WPM) suplementado com 1,0 mg L-1 de ácido naftaleno-acético (ANA) + 5,0 mg L-1 de zeatina ribosídeo (ZEA), para se obter brotações em segmentos internodais, sendo que a carbenicilina (Cb) adicionada a este meio potencializa esta formação. Para o processo de alongamento de brotos, este mesmo antibiótico quando adicionado ao meio WPM em concentrações crescentes (100; 250; 500 mg L-1) promove uma diminuição na altura de plantas, número de nós e comprimento radicular. Após o co-cultivo de segmentos internodais com Agrobacterium tumefaciens estas concentrações de Cb não são eficientes na eliminação da bactéria, o que compromete a organogênese. No entanto, é possível estabelecer um protocolo de organogênese in vitro de batata cv. Atlantic a partir de segmentos internodais não co-cultivados. Estes resultados serão úteis para futuros experimentos de transformação genética com esta e outras cultivares comerciais de batata.

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Expressão eficiente do gene reporter beta-glucuronidase nos tecidos vasculares de batata (Solanum tuberosum L.) utilizando de um promotor específico (BRA3) de Agrobacterium rhizogenes

et al. 2003

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Promotores tecido-específico controlam a transcrição de genes em diferentes tecidos vegetais bem como em diferentes estádios de desenvolvimento da planta, levando à indução de distintos níveis de atividade transiente e/ou estável do gene. Tais promotores podem ser empregados para a expressão seletiva de genes de interesse. O promotor rol A de Agrobacterium rhizogenes, por exemplo, é floema-específico, sugerindo que possa ser empregado em estratégias de defesa de plantas que são infectadas por vírus com replicação restrita ao floema. A expressão do gene marcador da ß-glucuronidase (gus) dirigido pelo promotor rol A (pBRA3) foi observada em plantas transgênicas de batata (cvs. Macaca e Baronesa). Entrenós e secções de folhas foram submetidos ao cocultivo com A. tumefaciens. A atividade do gene gus avaliada em brotações resistentes à canamicina não se restringiu ao floema (alto nível de expressão do gene), mas também se manifestou no xilema dos caules. As expressões transiente e estável são, no entanto, tecido-específicas, localizadas sobretudo no sistema vascular de entrenós e ausente em raízes e folhas. As plantas gus positivas foram micropropagadas, plantadas em casa de vegetação e avaliadas por PCR, utilizando-se 'primers' específicos para o gene npt II. Nenhuma alteração fenotípica foi observada em plantas transgênicas, em relação às não transformadas.

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Transformação genética da batata cultivar Achat via Agrobacterium tumefaciens

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A direct organogenesis protocol from shoot segments of Solanum tuberosum cv. Monalisa

A direct organogenesis protocol from shoot segments of Solanum tuberosum cv. Monalisa

Organogênese in vitro de batata (Solanum tuberosum L.) cultivar Atlantic visando transformação genética

Expressão eficiente do gene reporter beta-glucuronidase nos tecidos vasculares de batata (Solanum tuberosum L.) utilizando de um promotor específico (BRA3) de Agrobacterium rhizogenes

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