Short term maintenance of sheep preantral follicles in situ in 0.9% saline and Braun–Collins solution

Andrade, Evelyn Rabelo; Rodrigues, Ana Paula Ribeiro; Amorim, Christiani Andrade; Carvalho, Fabíola Christian Almeida de; Dode, M. A. N.; Figueiredo, José Ricardo de

doi:10.1016/s0921-4488(01)00200-0

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“…A conservação de fragmentos ovarianos a 4°C por até 24h manteve a porcentagem de folículos pré-antrais normais similar à de folículos-controle, independente do meio utilizado. Foi demonstrado, em pequenos ruminantes, que a temperatura de 4°C pode ser utilizada com sucesso na conservação de foliculos pré-antrais, por até 24h, em soluções simples, como a solução salina 0,9% em caprinos (Carvalho et al, 2001;Costa et al, 2002) e ovinos (Andrade et al, 2001), em soluções ricas em nutrientes, como o TCM 199, também em caprinos (Ferreira et al, 2001) e ovinos (Andrade et al, 2002;Matos et al, 2004) ou em soluções hiperosmóticas, como a solução Braun-Collins em caprinos (Silva et al, 2000). Roy e Treacy (1993) Quando folículos pré-antrais foram estocados a 20°C por até 4 e 12h em solução salina e TCM 199, respectivamente, a porcentagem de folículos pré-antrais normais não diferiu daquela observada no controle.…”

Section: Discussionunclassified

“…Resultados similares foram obtidos com folículos pré-antrais frescos bovinos (Erickson, 1986), murinos (Hirshfield, 1988), caprinos (Bezerra et al, 1998;Lucci et al, 1999) e ovinos (Jorio et al, 1991), estocados a 4°C em felinos (Wood et al, 1997), caprinos (Ferreira et al, 2001;) e ovinos (Andrade et al, 2001;Matos et al, 2004), bem como no cultivo de folículos pré-antrais bovinos (Figueiredo et al, 1994;Braw e Yossefi., 1997). Segundo Lucci et al (2004), maior porcentagem de folículos degenerados tipo 1 foi encontrada no grupocontrole, bem como nos tratamentos que não diferiram dele.…”

Section: Discussionunclassified

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Conservação de folículos pré-antrais bovinos em solução salina 0,9% ou TCM 199

Celestino¹,

Santos²,

Martins³

et al. 2007

Arq. Bras. Med. Vet. Zootec.

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Conservação de folículos pré-antrais bovinos RESUMOInvestigou-se a eficiência da solução salina 0,9% (SS) e TCM 199 na conservação de folículos pré-antrais (FOPA) bovinos in situ em diferentes temperaturas e tempos de incubação. Cada par ovariano foi dividido em 25 fragmentos. Um fragmento foi escolhido aleatoriamente e fixado imediatamente após a coleta (controle). Os demais foram distribuídos em tubos contendo SS ou TCM 199 a 4, 20 ou 39ºC por 2, 4, 12 ou 24h. A análise histológica mostrou que a conservação a 4ºC em ambas as soluções manteve a porcentagem de FOPA normais similar ao controle. A conservação em SS a 20ºC por 12 ou 24h, TCM 199 a 20ºC por 24h e em ambas as soluções a 39ºC a partir de 2h aumentou (P<0,05) a porcentagem de FOPA degenerados comparada à porcentagem de folículos-controle. Em ambas as soluções, independente do tempo de incubação, a porcentagem de folículos normais, após conservação a 39ºC, foi (P<0,05) menor que a obtida com 4 e 20ºC. FOPA bovinos podem ser conservados eficientemente a 4ºC por até 24h em ambas as soluções, e a 20ºC por 4 e 12h em SS e TCM 199, respectivamente.Palavras-chave: bovino, folículo pré-antral, preservação SS or TCM 199 at 4, 20 or 39ºC for 2, 4, 12 4 and 12h in SS and TCM 199, respectively. ABSTRACT The efficiency of 0.9% saline solution (SS) and TCM 199 on the preservation of bovine preantral follicles (PF) in situ at different temperatures and incubation times was investigated. Each ovarian pair was divided into 25 fragments. One fragment was taken randomly and immediately fixed (control). The other fragments were distributed in tubes containing

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Section: Discussionunclassified

Conservação de folículos pré-antrais bovinos em solução salina 0,9% ou TCM 199

Celestino¹,

Santos²,

Martins³

et al. 2007

Arq. Bras. Med. Vet. Zootec.

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“…Although studies available did not specifically evaluate the effect of media and temperature on the preservation of primordial follicles (they usually considered all classes of preantral follicles together), they demonstrated that a temperature of 4 °C has been successfully used in the follicular preservation for 24 h in solutions poor (saline [12] and [15]) and rich (TCM 199 [17]) in nutrients or hyperosmotic (Braun-Collins solution [18]). Therefore, at 4 °C the composition of the medium is not a limiting factor.…”

Section: Discussionmentioning

confidence: 99%

“…Saline solution (0.9%) is largely cited as a short-duration preservation medium for ovaries (cattle [13]; goat [14]) and for preservation of goat [12] and sheep [15] preantral follicles in situ. However, TCM 199 has been successfully used in the preservation of goat [16] and sheep [17] preantral follicles.…”

Section: Introductionmentioning

confidence: 99%

Morphological and ultrastructural analysis of sheep primordial follicles preserved in 0.9% saline solution and TCM 199

MATOS

2004

Theriogenology

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The objective was to determine the morphological and ultrastructural features of sheep primordial follicles preserved in either 0.9% saline solution or TCM 199 at different temperatures. Soon after death, the ovarian pair of each ewe (n=5) was divided into 25 fragments. One fragment was immediately fixed for morphological evaluation (control). The other 24 fragments were randomly distributed in tubes containing 2 ml of 0.9% saline solution or TCM 199 and maintained at 4, 20 or 39 °C for 2, 4, 12, or 24 h. Based on histological assessment, storage of ovarian fragments in 0.9% saline solution at 20 °C for up to 24 h and in both solutions at 39 °C for 4, 12 or 24 h increased (P<0.01) the percentage of degenerate primordial follicles compared with controls. In contrast, preservation at 4 °C in both solutions, kept the percentage of morphologically normal primordial follicles similar to control values. Although histological integrity of primordial follicles was maintained in fragments stored at 20 °C for up to 24 h in TCM 199, these results were not confirmed by ultrastructural analysis. Based on transmission electron microscopy, only primordial follicles stored at 4 °C for up to 24 h, at 20 °C for up to 12 h and at 39 °C for up to 2 h in both solutions were ultrastructurally normal. In conclusion, sheep primordial follicles were successfully preserved at 4 °C for up to 24 h, at 20 °C for up to 12 h and at 39 °C for 2 h in 0.9% saline solution or TCM 199.

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“…Studies have demonstrated that storage of ovine and caprine ovarian fragments at 4°C results in proper rates of morphologically normal follicles compared to higher temperatures such as 20 or 35 °C (ANDRADE et al, 2001;MATOS et al, 2004;COSTA et al, 2005). Chaves et al (2008) have shown that ovarian tissue transportation in Minimal Essential Medium (MEM) at 4°C for up to 4 h maintained the percentages of morphologically normal follicles similar to those observed in fresh tissues even after 7 days of in vitro culture.…”

Section: Introductionmentioning

confidence: 97%

Effect of ovarian tissue storage in Morus nigra extract on the morphology and DNA fragmentation of ovine preantral follicles

Cavalcante

Barberino

Gouveia

et al. 2017

SCA

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This study demonstrated the effect of Morus nigra leaf extract during ovine ovarian tissue transportation on the survival and apoptosis of preantral follicles in vitro. High Performance Liquid Chromatography (HPLC) was used to determine the fingerprint chromatogram of the crude ethanolic extract. Four pairs of ovaries from four sheep were collected. The ovarian cortex was fragmented and one fragment was fixed in 10% buffered formaldehyde and processed for histological and TUNEL analyses (fresh control). The other fragments were placed in Minimal Essential Medium (MEM -control medium) or M. nigra extract (0.025; 0.05 or 0.1 mg/mL) and stored (simulating transport) at 4ºC for 6, 12 or 24 h. Preserved fragments (6 h) were also destined to histological and TUNEL analyses. HPLC analysis confirmed the presence of antioxidant compounds (rutin, isoquercetin e kaempferitrin) in the extract. There was a decrease (P < 0.05) in the percentage of morphologically normal preantral follicles after preservation in all treatments compared to the fresh control. The percentage of normal preantral follicles after preservation in M. nigra at 0.05 mg/mL for 6 h was higher (P < 0.05) than in MEM or 0.025 mg/ mL M. nigra and similar (P > 0.05) to 0.1 mg/mL of the extract. Apoptosis increased (P < 0.05) after conservation for 6 h in all treatments compared to the fresh control. Moreover, TUNEL positive cells decreased (P < 0.05) after preservation in 0.05 or 0.1 mg/mL M. nigra compared to MEM or 0.025 mg/ mL M. nigra. In conclusion, 0.05 mg/mL M. nigra extract can be used as a preservation medium for ovine ovarian tissue at 4°C for up to 6 h. ResumoEste estudo demonstrou o efeito do extrato das folhas de Morus nigra durante o transporte na sobrevivência e apoptose de folículos pré-antrais in vitro. A CLAE (Cromatografia Líquida de Alta Eficiência) foi usada para determinar a impressão digital cromatográfica do extrato etanólico. Foram coletados 4 pares de ovários de 4 ovelhas. O córtex ovariano foi fragmentado e um dos fragmentos foi fixado em formaldeído tamponado a 10% e destinado às análises histológica e de TUNEL (controle fresco). Os demais fragmentos foram colocados em Meio Essencial Mínimo (MEM -meio controle) ou extrato de M. nigra (0,025, 0,05 ou 0,1 mg/mL) e conservados (simulando transporte) à 4 ºC por 6, 12 ou 24 h. Os fragmentos conservados (6 h) também foram destinados às análises histológica e de TUNEL. A análise de CLAE confirmou a presença de compostos antioxidantes (rutina, isoquercetina e canferitrina) no extrato. Houve uma redução (P < 0,05) na percentagem de folículos pré-antrais morfologicamente normais após conservação em todos os tratamentos em comparação com o controle fresco. A percentagem de folículos pré-antrais normais após conservação em M. nigra a 0,05 mg/mL por 6 h foi maior (P < 0,05) do que em MEM ou M. nigra a 0,025 mg/mL e similar (P > 0,05) ao extrato a 0,1 mg/mL. A apoptose aumentou (P < 0,05) após conservação durante 6 h em todos os tratamentos em comparação com o controle fresco. Além diss...

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Short term maintenance of sheep preantral follicles in situ in 0.9% saline and Braun–Collins solution

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Conservação de folículos pré-antrais bovinos em solução salina 0,9% ou TCM 199

Conservação de folículos pré-antrais bovinos em solução salina 0,9% ou TCM 199

Morphological and ultrastructural analysis of sheep primordial follicles preserved in 0.9% saline solution and TCM 199

Effect of ovarian tissue storage in Morus nigra extract on the morphology and DNA fragmentation of ovine preantral follicles

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