Platelet-derived growth factor (PDGF)-induced actin rearrangement is deregulated in cells expressing a mutant Y778F PDGF β-receptor

Abstract

Platelet-derived growth factor-stimulated actin rearrangement and edge ruffle formation have previously been shown to be dependent on activation of phosphatidylinositol 3′-kinase, the activity of which also is important for directed migration of cells. This lipid kinase binds to phosphorylated tyrosine residues Y740 and Y751 in the kinase insert of the human platelet-derived growth factor ss-receptor. We examined the role of two other tyrosine residues in the kinase insert of this receptor, Y775 and Y778, for ligand-induced actin rearrangement. Both were shown to be phosphorylation sites; Y775 was only marginally phosphorylated in cells expressing the wild-type ss-receptor, whereas Y778 was phosphorylated at higher stoichiometry. Mutant receptors Y775F, Y778F and Y775/778F were active kinases and mediated proliferative responses when expressed in porcine aortic endothelial cells. Fluorescence staining of actin in platelet-derived growth factor-stimulated PAE cells revealed that Y778 is involved in regulation of the actin cytoskeleton since the cells contained, apart from edge ruffles and circular ruffles, a novel type of giant ruffle on the dorsal side of the cell, which consisted of irregular multilayered actin structures. Mutation at Y778 had no effect on activation of phosphatidylinositol 3′-kinase, nor on the GTPase activating protein of Ras and phospholipase C(gamma), and the extent of directed migration towards platelet-derived growth factor of these cells was not changed. We conclude that actin rearrangement is regulated in part by Y778 in the platelet-derived growth factor ss-receptor, potentially through binding of a novel signaling molecule to this site.

Essential function of adaptor protein Nck1 in platelet-derived growth factor receptor signaling in human lens epithelial cells

“…Many proteins are involved in PDGFR-mediated signaling, one of them being Nck adaptor protein. It has been shown that Nck can be recruited to bind the PDGFR via its SH2 domain 21 , 33 , 34 . However, the functional role of Nck1 proteins in PDGFR-induced LEC is not well understood.…”

Mecanismos de protección frente a rotenona por PDGF-BB en un modelo astrocitario

“…Otro aspecto importante del PDGF-BB es el referente a la modulación ejercida por este factor de crecimiento sobre los cambios morfológicos de las células. Al respecto se ha mostrado que el PDGF-BB induce formación de lamelipodios e incremento de la motilidad en fibroblastos mediado por rearreglos en las fibras de actina, siendo estos procesos dependientes de la quinasa PI3K (Hedberg, et al, 1993;Ruusala et al, 1998). También se ha visto que la expresión del receptor PDGFRβ es necesario para el desarrollo de la cresta neural embrionaria, el desarrollo y diferenciación astrocitaria y la morfogénesis y plasticidad de espinas dendríticas (Svitkina et al, 2010;Funa y Sasahara, 2014) Igualmente se ha mostrado que factores de crecimiento como el PDGF-BB y el VEGF inducen la activación de la proteína RhoA en células endoteliales, durante el proceso de angiogénesis (Nobes et al, 1995;van Nieuw et al, 2003).…”

“…Además, se ha demostrado que tanto Rac1 como RhoA de la familia GTPasas de Ras median la formación de procesos en cultivos de astrocitos hipocampales de rata (Kalman et al, 1999), sugiriendo la importancia de estas proteínas para la morfología astrocitaria. Por otra parte, se ha demostrado que el PDGF-BB puede activar mecanismos implicados en la modificación del citoesqueleto y la migración celular, incluyendo el desarrollo del SNC (Hedberg, et al, 1993;Ruusala et al, 1998;Zohrabian et al, 2009;Funa y Sasahara, 2014). Estos procesos pueden ocurrir por la movilización del fosfatidil inositol 3,4,5, y la consecuente activación de la proteína rac GTPasa de la familia Rho, que está implicada en la modificación del citoesqueleto de actina y cambios morfológicos (Nobes et al, 1995;Li et al, 2010), lo que sugiere la importancia del PDGF-BB en la regulación morfológica frente al insulto por rotenona.…”