Isolamento e identificação pela imunofluorescência direta e reação em cadeia de polimerase do vírus da artrite-encefalite caprina

Abstract

Amostras do vírus da artrite-encefalite caprina (CAEV) de animais dos estados de Minas Gerais e Pernambuco foram isoladas a partir de explantes de membrana sinovial (MS) (amostras BrMg 1-01, BrMg 2-01, BrMg 2-02, BrMg 2-03 e BrPe 1-01) ou de co-cultivo de leucócitos com MS (BrMg 1-02). As amostras foram identificadas pelo efeito citopático-ECP (formação de sincícios), imunofluorescência direta (IFD) e reação em cadeia de polimerase (PCR) aperfeiçoada para amplificação de parte do gene gag da amostra CAEV Cork. O estudo do ECP revelou a presença de amostras pouco (BrMg 1-01 e BrMg 1-02) ou fortemente indutoras de ECP (BrMg 2-01, BrMg 2-02, BrMg 2-03 e BrPe 1-01). A IFD mostrou resultado positivo em células de todas as monocamadas infectadas pelas amostras isoladas e em células de referência (CAEV Cork e visna/maedi K 1514). A PCR do DNA de células infectadas resultou na amplificação específica de um fragmento de DNA de 286pb da amostras testadas, exceto do visna/maedi K 1514.

Detecção da infecção pelo vírus da artrite-encefalite caprina: imunodifusão em ágar e reação em cadeia da polimerase com "primers" degenerados

“…Foi inicialmente descrito por Cork et al (1974) como agente causal de encefalite em caprinos jovens, sendo identificado como um retrovírus por Crawford et al (1980) em animais adultos com artrite crônica. Além de manifestações clínicas, a infecção está associada à mastite (Kennedy-Stoskopf et al, 1985) e à pneumonia intersticial (Narayan et al, 1997).…”

“…Devido às semellhanças observadas entre os dois vírus, e à possibilidade de infecção cruzada entre ovinos e caprinos, foram denominados lentivírus de pequenos ruminantes (SRLV) (Dickson & Ellis, 1989;Joag et al, 1996). A infecção por SRLV foi detectada em diversos países da Europa e das Américas (Adams et al, 1984;Narayan & Clemens, 1989), inclusive no Brasil (Moojen et al, 1986;Hötzel et al, 1993;Castro et al, 1999).…”

Artrite-encefalite dos caprinos - aspectos clínicos e epidemiológicos

“…As diferenças, freqüentemente descritas, estariam relacionadas a certas normas de manejo dos caprinos, às vezes privilegiando os machos e, em outras, as fêmeas (CRAWFORD e ADAMS, 1981;GREWAL et al, 1986 KENNEDY-STOSKOPF et al, 1985;NARAYAN e CORK, 1990;COFFIN, 1996;JOAG et al, 1996;FRANCKI et al, 1991;EAST, 1996 ELLIS et al, 1986;BULGIN, 1990 CORK, 1976;ADAMS et al, 1980;CRAWFORD et al, 1980;CRAWFORD e ADAMS, 1981;SIMS et al, 1983;ELLIS et al, 1988;NARAYAN e CORK, 1990;PÉTURSSON et al, 1992). MONICAT, 1987;PERRIN et al, 1988), apesar de, no Brasil, alguns especialistas contestarem essa possibilidade ROSSINI et al, 1996) OLIVER et al, 1982;RUSSO, 1983;SIMS et al, 1983;HÖTZEL et al, 1993;TEST et al, 1999;CASTRO et al, 1999b); por evidenciação do vírus em microscopia eletrônica (ELLIS et al, 1983); pela reação em cadeia de polimerase -PCR (RIMSTAD et al, 1993;CLAVIJO e THORSEN, 1996) ou pela hibridização in situ (ZINK et al, 1990).…”

“…FRANCKI et al, 1991 (COFFIN, 1996;JOAG et al, 1996). OLIVER et al, 1982;ELLIS et al, 1983;RUSSO, 1983;SIMS et al, 1983;HÖTZEL et al, 1993;CASTRO et al, 1999b), do cérebro , do plexo coróide (OLIVER et al, 1982;SIMS et al, 1983;AGRIMI et al, 1985;KENNEDY-STOSKOPF et al, 1985), de leucócitos do sangue periférico (PAWLISCH e MAES, 1984;KENNEDY-STOSKOPF et al, 1985;LERONDELLE et al, 1989;TEST et al, 1999;CASTRO et al, 1999b), do pulmão KENNEDY-STOSKOPF et al, 1985) e da glândula mamária ).…”

“…A avaliação laboratorial imuno-sorológica para detecção da infecção pelo vírus da Artrite-encefalite dos Caprinos, tem sido feita de duas formas: por técnicas diretas ou indiretas. A detecção direta da presença do vírus no organismo do caprino, pode ser realizada, tanto pelo isolamento do agente etiológico da doença, em cultura celular OLIVER et al, 1982;RUSSO, 1983;SIMS et al, 1983;HÖTZEL et al, 1993;CASTRO et al, 1999b), por evidenciação do vírus em microscopia eletrônica (ELLIS et al, 1983), como também por reação em cadeia de polimerase -PCR (RIMSTAD et al, 1993;CLAVIJO e THORSEN, 1996) ou pela técnica da hibridização in situ (ZINK et al, 1990).…”