ISCR1 asociado con genes blaCTX-M-1 y blaCTX-M-2 en plásmidos IncN e IncFIIA aislados en Klebsiella pneumoniae de origen nosocomial en Mérida, Venezuela

Abstract

hicieron la caracterización fenotípica y molecular de las cepas estudiadas, así como el análisis bioinformático. Gabriel Gutkind y María Araque diseñaron el estudio, la discusión crítica y la escritura final del manuscrito. ARTÍCULO ORIGINAL Biomédica 2013;33:268- Introducción. Las secuencias de inserción tales como ISCR1 promueven la captura, transposición y expresión de los genes bla CTX-M , facilitando, de esta manera, su diseminación rápida en la población bacteriana.Objetivo. Se determinó la presencia del elemento ISCR1 y su asociación con genes bla CTX-M-1 y bla CTX-M-2 en plásmidos de diferentes grupos de incompatibilidad en Klebsiella pneumoniae de origen hospitalario. Materiales y métodos. Se aislaron tres cepas de K. pneumoniae con sensibilidad disminuida a cefalosporinas de amplio espectro, de neonatos con septicemia hospitalaria. La presencia de β-lactamasas de espectro expandido (BLEE) fue determinada fenotípicamente. Los plásmidos se aislaron y clasificaron según grupos de incompatibilidad por tipificación del replicón por reacción en cadena de la polimerasa (PCR). Los genes bla BLEE y su asociación a ISCR1 se determinaron por PCR y secuenciación directa, usando varios juegos de iniciadores.Resultados. Todas las cepas demostraron un perfil fenotípico indicativo de producción de BLEE, transferibles por conjugación. Los ensayos de PCR para para cefotaximasas (CTX-M) y el análisis de la secuenciación, revelaron que las cepas portaban genes bla CTX-M-1 y bla CTX-M-2. Estos genes se encontraron en plásmidos conjugados de 150 kb, aproximadamente, relacionados con los grupos IncN e IncFIIA, respectivamente. ISCR1 se encontró 'aguas arriba' (upstream) y asociado con los genes bla CTX-M-1 y bla CTX-M-2 .Conclusión. Este es el primer reporte realizado en Venezuela donde la presencia de ISCR1 está estrechamente asociada con la movilización de los genes bla CTX-M-1 y bla CTX-M-2 en plásmidos conjugativos IncN y IncFIIA en cepas de K. pneumoniae que circulan en una Unidad de Alto Riesgo Neonatal.Palabras clave: Klebsiella pneumoniae, plásmidos, infección hospitalaria, beta-lactamasas, cefotaxima, elementos transponibles de ADN. Materials and methods:Three strains of K. pneumoniae with reduced susceptibility to extendedspectrum cephalosporins were isolated from neonatal sepsis cases of nosocomial origin. Phenotypic tests showed the presence of ESBLs. Plasmids were isolated and classified according to incompatibility groups by PCR replicon typing. Detection and association of ISCR1 with bla CTX-M genes were determined by PCR and direct sequencing through the use of several sets of PCR primers. Results: All strains showed phenotypic profile consistent with ESBL-producing transferred by conjugation. PCR amplification assay for CTX-M together with sequencing analysis revealed that

First Description of KPC-2-ProducingKlebsiella oxytocaIsolated from a Pediatric Patient with Nosocomial Pneumonia in Venezuela

“…These outbreaks have been characterized by a complex epidemiological situation, in which the presence of different clones and ESBLs has been involved [18, 19]. Therefore, these infections have been treated mainly with carbapenems.…”

“…Many studies have linked hands of health-care workers with the emergence of MDR K. oxytoca infections outbreaks [1–8, 19]. Therefore, the importance of hand washing and compliance with guidelines for preventing nosocomial infections were emphasized to the personnel at the time this case was studied.…”

Vigilancia, prevención, diagnóstico y tratamiento de las resistencias a antibióticos B-lactámicos desde la perspectiva One Health

“…another important element in the genetic platforms associated with the dissemination of CTX-M genes (Rodriguez-Martinez et al, 2006;Toleman et al, 2006a;Zhao and Hu, 2013). In general, ISCR1 has been associated with CTX-M-2 and CTX-M-9 subtypes (Toleman et al, 2006a(Toleman et al, , 2006bMillan et al, 2012), but the majority of our strains carrying this IS were CTX-M-14 and CTX-M-15 producers. That could explain the low number of strains carrying ISCR1.…”