Identification of a 48 kDa form of unconventional myosin 1c in blood serum of patients with autoimmune diseases

Abstract

We searched for protein markers present in blood serum of multiple sclerosis (MS), rheumatoid arthritis (RA) and systemic lupus erythematosus (SLE) patients in comparison to healthy human individuals. We used precipitation/extraction methods and MALDI TOF/TOF mass spectrometry, and identified a protein with Mr ~46 kDa as a fragment of human unconventional myosin IC isoform b (Myo1C). Western blotting with specific anti-human Myo1C antibodies confirmed the identity. Screening of blood serum samples from different autoimmune patients for the presence of Myo1c revealed its high level in MS and RA patients, relatively low level in SLE patients, and undetected in healthy donors. These data are suggesting that the level of p46 Myo1C in blood serum is a potential marker for testing of autoimmune diseases.

Identification of the Unique Properties of IgGs and their Heavy chains in Blood Serum of Multiple Sclerosis Patients

“…The results of the SDSelectrophoresis have shown that a TCA-extracted fraction obtained from a blood serum of MS patients mainly contains proteins with 66, 55, 46, and 25 kDa molecular masses (Figureure 1A). MALDI TOF/TOF analysis identified 66 kDa and 46 kDa polypeptides as blood serum albumin and 46 kDa fragment of the un-conventional myosine 1c (Myo 1C) [13], while the nature of two other proteins remained unknown. We have suggested that these 55 and 25 kDa polypeptides (Figure 1) correspond to heavy and light chains of the IgGs.…”

“…Recently, we have shown that a TCA-extracted fraction obtained from blood serum of MS patients contains two proteins that were identified by the MALDI TOF/TOF as blood serum albumin (BSA) and 46 kDa form of unconventional myosin 1c (Myo 1C) [13]. Here we demonstrated that TCAextracted fractions isolated from blood serum of MS patients also contain IgGs and/or their heavy chains.…”

Інститут Біології Клітини, Національна Академія Наук України, М. Львів, Україна

“…З огляду на нові дані про участь В-клітин в патогене-зі РС останні стали актив-но досліджуватись з позиції клінічних біомаркерів. Ра-ніше нами було показано діагностичні можливості 48 кДа форми неконвен-ційного (позам'язового) міозину 1с (48 кДа Муо1с) як біомаркера апоптозу ак-тивованих В-клітин [20]. Myo1c у великій кількості експресується в активова-них В-лімфоцитах, а саме в плазматичній мембрані, особливо в периферич-них відростках, таких як мікроворсинки (рис.…”

“…Якщо ж активація відбувається надто довго або активований лімфоцит не знаходить трива-лий час своєї мішені, він елімінується шляхом актива-ційно-індукованої загибелі клітин (activation-induced cell death) [22]. У свою чергу, у кров потрапляють у значній кількості продукти деградації активованих В-лімфоцитів, зокрема 48 кДа Муо1с [20].…”

“…У дослідженні використали такі методи: клінічні -аналіз скарг, анамнезу захворювання та життя, деталь-ний соматичний та неврологічний огляди з оцінкою ступеня інвалідизації за шкалою EDSS Куртцке [23]; лабораторні -шляхом послідовного осадження си-роваткових білків, електрофорезу та цифрового ана-лізу одержаних електрофореграм у сироватці крові хворих на розсіяний склероз визначали вміст 48 кДа Myo1c, при цьому наявність Myo1c підтверджували за допомогою вестерн-блоту з анти-Myo1c антитілами [20]; інструментальні -магнітно-резонансна томо-графія головного та/або спинного мозку (лише для діагностики РС).…”