Human cryptosporidiosis: detection of specific antibodies in the serum by an indirect immunofluorescence

Abstract

Cryptosporidium sp., a coccidian parasite usually found in the faeces of cattle, has been recently implicated as an agent of human intestinal disease, mainly in immunocompromised patients. In the study realized, by an indirect immunofluorescence technique, specific immunoglobulins (IgG and IgM) have been demonstrated in human serum against Cryptosporidium oocysts. Purified oocysts were used as antigens in the indirect immunofluorecence assay. After analyzing this test in sera from selected groups of patients, the frequency of both specific IgG and IgM of immunocompetent children who were excreting oocysts in their faeces was 62% and in children with negative excretion of oocysts was 20% and 40%, respectively. In adults infected with the human immunodeficiency virus (HIV) and who were excreting Cryptosporidium in their stools, the frequency was 57% for IgG but only 2% for IgM. Twenty three percent of immunocompromised adults with not determined excretion of oocysts in their stools had anti-Cryptosporidium IgG in their sera. Children infected with human immunodeficiency virus had no IgM and only 14% had IgG detectable in their sera. The indirect immunoflorescence assay, when used with other parasitological techniques appears to be useful for retrospective population studies and for diagnosis of acute infection. The humoral immune response of HIV positive patients to this protozoan agent needs clarification.

Risk factors, seasonality, and trends of cryptosporidiosis among patients infected with human immunodeficiency virus.

“…16 The fact that the peak number of cases occurred in 1994 (n ϭ 48), one year after the massive outbreak of cryptosporidiosis in Milwaukee, WI, suggests that the publicity surrounding the outbreak may have contributed to an increase in physicians' and patients' awareness of this disease. The decrease in the occurrence of cryptosporidiosis after 1996 may be due in part to the adoption of preventive measures among AIDS patients (drinking bottled water) and to the introduction of HAART.…”

“…The diagnosis of cryptosporidiosis was based on the presence of oocysts in the stool, a method known to produce false negative results. 16 Patients with the disease may therefore have been misclassified and counted as not having it. Therefore, the number of cases would have been under reported, leading to an underestimation of the magnitude of cryptosporidiosis in the area.…”

Распространенность Криптоспоридиоза У Детей С Диареей В Донецкой Области, Украина

“…І.І. Мечникова НАМН України» за технологією, детально описаною в [20]. Діагностикум ПОАгCrypto являє собою предметні скельця (76 × 26 × 1 мм) з епоксидним покриттям синього кольору та ізольованими реакційними лунками (діаметром 12 × 5 мм), до поверхні яких іммобілізовано калібровану кількість очищених ооцист (на рівні 30-60 у кожному полі зору за умови сумарного збільшення мікроскопу ×1000) регіонального штаму C.parvum ЛНМІЗ 3/2018, видову приналежність якого попередньо було ідентифіковано методом стандартної полімеразної ланцюгової реакції (ПЛР) з використанням «Набору реагентів для ампліфікації ДНК Cryptosporidium parvum.…”

“…Основний методичний принцип застосованого типового формату РНІФ ґрунтується на можливості утворення специфічного комплексу: ПОАгCrypto + специфічні Ig досліджуваної сироватки + антивидові Ig проти Ig∑, IgG, IgM, IgА людини, які мічені флуоресцентним барвником (флуоресцеїн-ізотіоціанатом, ФІТЦ), що дозволяє при проведенні люмінесцентної мікроскопії виявляти (візуалізувати) вказаний об'єднаний комплекс [20]. Як антивидові флуоресціюючі Ig було використано комерційні сухі Ig проти Ig∑, IgG та IgM людини виробництва філіалу «МЕДГАМАЛ» ДУ «НИИ эпидемиологии и микробиологии им.…”

“…Оригінальні [20]. Проте, згідно із представленими в їх роботі даними, у ФРБ рівень ЧЕО у імунокомпетентних дітей з діареєю (OEP 12,1 %) є в 2,9 раза вищим від визначеного нами.…”