High Level Secretion of Recombinant Human Serum Albumin by Fed-Batch Fermentation of the Methylotrophic Yeast, Pichia pastoris, Based on Optimal Methanol Feeding Strategy.

Kobayashi, Kaoru; Kuwae, Shinobu; Ohya, Takeshi; Ohda, Toyoo; Ohyama, Masao; Tomomitsu, Kenji

doi:10.1263/jbb.90.280

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“…The HSA prepared from plasma was Albutein Ò Alpha Therapeutic Corporation (Los Angeles, CA), which is a commercial product. The recombinant HSA was a protein for use in a clinical trial 5,6) Sulfhydryl compounds in non-mercapto forms of HSA. Sulfhydryl compounds in HSA were determined using a reverse-phase highperformance liquid chromatography (RP-HPLC) system with an in-house modification that contained a coil-reactor, as described by Yasuhara and Nokihara.…”

Section: Methodsmentioning

confidence: 99%

“…Recently, HSA was successfully produced and purified from the yeast Pichia pastoris by recombinant DNA technology. [5][6][7][8] Earlier, conventional physicochemical characterization was carried out to show that purified HSA produced by recombinant technology is heterogeneous with HSA from plasma. 9) Subsequently, Ikegaya et al made a complete determination of the positions of the 17 disulfide linkages among the 35 cysteinyl residues of this recombinant HSA using mild gas-phase Edman degradation followed by isocratic analysis of the phenylthiohydantoin derivative of amino acids combined with multi-enzymatic digestion.…”

mentioning

confidence: 99%

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Characterization of Sulfhydryl Heterogeneity in Human Serum Albumin and Recombinant Human Serum Albumin for Clinical Use

Ikegaya¹,

Nokihara

Yasuhara

2010

Bioscience, Biotechnology, and Biochemistry

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Since human serum albumin has one sulfhydryl group and 17 disulfides, reactive sulfhydryl groups give rise to heterogeneity. The present paper presents a comparison of sulfhydryl heterogeneity in human serum albumin and recombinant human serum albumin for clinical use. Low molecular weight sulfhydryl compounds were identified from both sources. The recombinant albumin had a much higher sulfhydryl content than plasma serum albumin.

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Section: Methodsmentioning

confidence: 99%

mentioning

confidence: 99%

Characterization of Sulfhydryl Heterogeneity in Human Serum Albumin and Recombinant Human Serum Albumin for Clinical Use

Ikegaya¹,

Nokihara

Yasuhara

2010

Bioscience, Biotechnology, and Biochemistry

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“…Higher product yields for many recombinant proteins have resulted by developing a model for methanol uti lization and then using that model to predict and control specifi c growth rates (Kobayashi et al 2000;Zhang et al 2000b;d'Anjou and Daugulis 2001). When this fermen tation strategy was applied to the rOvIFN-τ process, maximal yields occurred at an optimal and constant culture growth rate of approximately 0.025 per hour (Sinha et al 2003).…”

Section: Introductionmentioning

confidence: 99%

Pichia pastoris fermentation optimization: energy state and testing a growth-associated model

Plantz

Sinha

Villarete³

et al. 2006

Appl Microbiol Biotechnol

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“…Finally, other authors have reported monotonously (Kobayashi et al, 2000) and nonmonotonously (Potgieter et al, 2010) decreasing protein productivities with increasing specific growth rates. The former approximated protein productivity to the following expression:…”

Section: A·μ π (17)mentioning

confidence: 70%

“…In these cases, different control schemes have been employed, from Proportional-Integral-Derivative control algorithms (Cos et al, 2006b), to more sophisticated strategies such as dynamic programming for optimal specific growth rate (Kobayashi et al, 2000), or a minimalvariance-controller and a semi-continuous Kalman-filter and online methanol consumption rate-based feeding profile (Hang et al, 2008).…”

Section: Monod Modelmentioning

confidence: 99%

Process development for the obtention and use of recombinant glycosidases: expression, modelling and immobilisation

Serra¹

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"There is a driving force more powerful than steam, electricity and nuclear power: the will." Albert Einstein 5 AgradecimientosQuiero dar las gracias a todas las personas que me han acompañado estos años y a las que debo, por distintas razones pero todas importantes, haber conseguido llevar a cabo esta tesis.A mis directores, Daniel, por darme su confianza desde el principio y ejemplo, día tras día, y Jesús, por descubrirme la biología de sistemas y su respaldo incondicional y permanente. A los dos, por pensar que es buena idea mezclar a biólogos e ingenieros, por ofrecerme la oportunidad de trabajar con ellos, y haber encontrado siempre tiempo para ayudarme.A la empresa Biopolis, por financiar mis cursos de formación y permitirme dedicar parte de mi tiempo a realizar este trabajo de investigación.A todo el Departamento de Ingeniería de Sistemas y Automática, por su profesionalidad, y por facilitarme siempre compatibilizar mi trabajo con la realización de la tesis doctoral, y en particular a Jose Luis y Quique por decidir un buen día aplicar su trabajo a estos bichos tan complejos.Muchas gracias a Kiko, por todas las tardes de trabajo y artículos compartidos, por su rigor y generosidad en la colaboración, sin la que gran parte de esta tesis no habría existido.A Pedro, Daniel y Jamal, del Instituto de Ciencia de los Materiales de la Universitat de València, por proporcionarme su ayuda, materiales para la inmovilización e ideas para el análisis y la discusión a lo largo de todos estos años.A todos los compañeros de Biopolis que han estado a mi lado cada día. Muchas gracias a mis más queridos moleculares Verónica, Alex, Antonia, Bea, Dani, Diego -con su ayuda salió el mejor transformante! -Dunja y Silbia, por demostrarme que lo imposible puede ser, y que vale la pena. Gracias a Esther, por animarme más y mejor que nadie. Gracias a María por sus consejos y HPLC inestimables. Gracias a Boro, Empar, Bea, Angela, Roseta, Josep, Patri, Aida, Pepa, Fernando, Silvia, Nuria, Rosa, Maria, Marta, Vicente, Bruno, Nico, Jose y Javi, y a Iryna, Ana, Lola, Jose, Vicky, Carlos, Nacho, Montse, Daniel y Violeta. Gracias a Emma, Chari, David y Mercedes por acogerme en su día en la planta piloto. Gracias a los chicos de Life, y especialmente a Cristina, Juan y Paco por tener siempre una sonrisa fuera de horario.A Jaime Primo y Mª Angeles Lluch, por abrirme las puertas de la biotecnología. A Chelo, Rosa y Miguel Ángel, por iniciarme en la investigación. A Jose Luis y Auxi y todas sus chicas, por acogerme con absoluta generosidad en su laboratorio y enseñarme cómo clonan los profesionales. Gracias también a los investigadores del IATA, Andrew, Marga, Luisa, Adela, Oscar, Juanan, Jose Vicente, Salvador y Paloma, por su apoyo imprescindible en los comienzos.A mis padres y mi hermana Carmela, por quererme y apoyarme siempre, y a toda mi familia, y especialmente, a mis abuelos, por creer en mí. A ellos, y los amigos que ya son de casa, por darme fuerzas y perspectiva. A Alfonso, porque sin él nada sería importante.¡Por fin! Gracias a todos...

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High Level Secretion of Recombinant Human Serum Albumin by Fed-Batch Fermentation of the Methylotrophic Yeast, Pichia pastoris, Based on Optimal Methanol Feeding Strategy.

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Process development for the obtention and use of recombinant glycosidases: expression, modelling and immobilisation

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